Daalụ maka ileta okike.com. Nchọpụta nke ihe nchọgharị ị na-eji enweghị oke CSS nkwado CSS. Maka nsonaazụ kachasị mma, anyị na-akwado ka ị jiri ụdị ihe nchọgharị gị (ma ọ bụ gbanyụọ ndakọrịta na Internet Explorer). Ka ọ dị ugbu a, iji hụ na nkwado na-aga n'ihu, anyị na-egosipụta saịtị ahụ na-enweghị Styling ma ọ bụ Javascript.
Uto microbil na ọnya na-egosipụtakarị onwe ya dị ka biofilms, nke gbochiri ọgwụgwọ ma sie ike ikpochapụ. A na-amaghị nrụpụta ọnya ọhụrụ, mana a na-amaghị nke ọma. Iji na vitro na na Vivo Biofilm Models nke staphyloconos aeruuginosa, anyị na-akọ ndabere ụdị ejiji Ag1; Ag1 + uwe na-eji akwa ndị ettetiaminet acid acid acid na Benzethonium chloride (Ag1 + / Edta / B), na uwe ehi ehi efu). , kedu nke na-emepụta AG1 +, Ag2 + na Ag Ag3 + iji lụso ọrịa bifilm na mmetụta ọ na-agwọ ọrịa. Ag1 + ejiji dị obere na-emetụta ọnya birlollm na vitro na ụmụ oke (c57bl / 6j). N'ụzọ dị iche, ag exyged oxyged na Ag1 / Edta / BC na-ebelata ọnụ ọgụgụ nje na viofils na nke nje na-eme ka ọnya ọnya dị ukwuu. Uwe ndị a nwere mmetụta dị iche iche na ọgwụgwọ Biofilm-oria na nje na-abụghị Biofilm, na oyungay, na akwa mkpuchi na akwa ọlaọcha ndị ọzọ. Ngwongwo physicochemical nke yiri ọla ọcha nwere ike inwe mmetụta dị iche iche na ọnya biofilm na ọgwụgwọ nke a na-ahọrọ akwa maka ọgwụgwọ nke biofilm-nje oria.
A na-akọwa ọnya na-adịghị ala ọcha dị ka "ọnya na-adaghị ịmalite ịgwọ ọrịa nkịtị na n'ụzọ ziri ezi" 1. Ọkụ na-adịghị ala mepụtara ibu mmadụ nke mmụọ, na nke akụnụba maka ndị ọrịa na sistemụ ahụike. Emefu ego na-emefu ihe mgbu na-agwọ ọnya na ndị na-eche ihe na-eme atụmatụ na £ 8.3 ijeri na 2017-182. Ọrịa na-adịghị ala ala bụkwa nsogbu ịpịa na United States, jiri Medicare na-ekwupụta ọnụ ọnụ na-emeso ndị ọrịa na $ 28.1- $ 96.8 ijeri3.
Ọrịa bụ ihe kachasị egbochi ọnya. Ọrịa na-apụtakarị dị ka biofilms, nke dị na 78% nke anaghị agwọ ọrịa na-adịghị ala ala. Biofilms n'ụdị microorganisms na-agbaghakwa na mbara igwe, dị ka ọnya, ma nwee ike ịchịkọta polymer polymen (EPS) - nke ọma -. Ọrịa Biofilm na-ejikọ ya na mmụba mkpali na-eduga na mmebi anụ ahụ, nke nwere ike igbu ma ọ bụ gbochie ọgwụgwọ4. Mmụba na mmebi anụ ahụ nwere ike ịbụ n'ihi mmụba nke ọrịa matriks Metallalpioteins, Collagenase, Estastase na Procias oxygen5. Ọzọkwa, sel ụfụfụ na biofilms bụ onwe ha na-akpata ọrịa oxygen na mkpụrụ ndụ oxygy dị mkpa maka nrụzi anụ ahụ dị mma.
Booflelms tozuru oke na-eguzogide ọgwụ antimicrobial ndị ọrụ ọgwụ mgbochi, chọrọ atụmatụ ihe ike iji jide ọgwụgwọ Biofilm, dị ka ọgwụgwọ nke arụmọrụ antimicrobial dị irè. N'ihi na biofilms nwere ike ịmaliteghachi ngwa ngwa, antimicrobialts dị irè nwere ike belata ihe ize ndụ nke ịmaliteghachi mgbe ịwa ahụ.
A na-ejikwa ọlaọcha na akwa mgbakwa antimicrobial ma na-ejikarị ọgwụgwọ mbụ maka ọnya na-adịghị ala ala. Enwere ọtụtụ akwa ọla ọla ọcha dị na azụmahịa, nke ọ bụla nwere ihe ndị mejupụtara ọla ọcha ọla ọcha ọla ọcha, matrik matrix. Ọganihu na ngwa agha ọlaọcha emeela ka mmepe nke ọla ọcha ọhụrụ. Ofdị ọla ọcha (AG0) bụ irè; Iji nweta arụmọrụ antimicrobial, ọ ga-efurịrị igwe elektrọn na-etolite ọla ọcha ionic (Ag1 +). Udidi ọdịnala nwere ọla ọcha ma ọ bụ ọla ọcha ọla ọcha nke, mgbe ekpughere mmiri mmiri, decompose, na-etolite Ag1 +. Igwe ndị a Ac1 ndị a na-emeghachi omume na Celllọ Ọrụ Ahụ, Wepụ Electrons sitere na usoro nhazi ma ọ bụ usoro dị mkpa dị mkpa maka nlanarị. Text teknụzụ emeela ka mmepe ọlaọcha ọhụrụ, AGYNYSALTS (NILL RITEL, AG7NO11), nke gụnyere na akwa ọnya. N'adịghị ka ọla ọcha ọdịnala, mbibi nke nnu oxygen na-emepụta steeti ọlaọcha (Ag1 +, Ag2 + na Ag3 +)). Na ọmụmụ vitro egosila na obere nnu nke nnu oxygen dị mma karịa otu nje na-enweghị atụ dịka Pseudomonas augunosa, Staphyloccolus Cori8,9. Typedị ụdị ọla ọcha ọzọ na-enwekarị ihe ndị ọzọ, ethlelediaminium acid acid (BC), nke a na-akọ na ịba ụba Biofilm nke ọlaọcha n'ime biofilm. Teknụzụlụ ọla ọcha ọhụrụ ndị a na-enye ụzọ ọhụụ iji zube ọnya biofilms. Agbanyeghị, mmetụta antimicronials ndị a na ọnya na-efe efe dị mkpa iji hụ na ha anaghị emepụta ọnọdụ ọnya na-adịghị mma ma ọ bụ na-egbu oge. A na-akọ nchegbu banyere vitro ọla ọcha cytotoxicity na ọtụtụ akwa ọla ọcha10,11. Agbanyeghị, na vitto Cytotoxicity atụtụbeghị n'ime oke mma dị na Vivo na-egbu maramara, uwe Ag1 egosipụtala ezigbo profaịlụ nchekwa nchekwa12.
N'ebe a, anyị na-enyocha arụmọrụ nke akwa igbe nwere ibu nwere ụdị ọlaọcha ọla ọcha na-emegide ọnya birlollm na vivo. Na mgbakwunye, ihe ndị a na-eme ka akwa ndị a na-aza na nzaghachi na ọgwụgwọ nwere onwe ya.
Ejiri akwa niile bụ azụmahịa. 3m Kerracel Gel Fiber Carting (3m, Knutsford, UK) bụ carmuxyyyythyyyyyyyyyyyyyyyythyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyythyyyyyyyyythyyylculose (cmc) na-enweghị mgbochi nke a na-eji eme ihe ọmụmụ a. A na-enyocha akwa ọla ọcha nke cmc atọ, ya bụ 3M Kerracel Ag na-eji akwa (3m, Knutsford, UK), nke nwere 1.7 wt%. nnu oxygen oxygen (Ag7no11) na elu di elu nilled oon (Ag1 +, Ag2 + na Ag3 +)). N'oge igirigi nke Ag7NO11, Ag1 +, Ag2 + na Ag3 + na agịga nke 1: 2: 4. Aquacel Ag kwa akwa nwere 1.2% ọla ọcha chloride (Ag1 +), Edtacec Ag 22)
Nsogbu a na-ejikarị aerudomonas augunosa NTTC 10781 (ahụike nke ọhaneze) na staphyloccolus nctc 6571 (ahụike ọhaneze, Salisbury).
Nta nje toro n'abali na muller-hinton efere (ehilondo, altrincham, UK). A na-ejikọ ọdịbendị nke abalị 1: 100 na Muerle-Hinson efere na 200 μl plerated pletes (MaigMone-WinT-Withr lld, Kent, Britain Britain ). ) Colofilm Guzoro na 37 Celsius C maka awa 24. A nwalere biofilms ndị a maka logarismic slardage.
Bee akwa ahụ n'ime 3 cm2 square iberibe na pre-modun na mmiri na-adọrọ adọrọ. Debe bandeeji n'elu biofilm nke ógbè ahụ na agar elar. A na-ewepụ ọ bụla nke biofilm, na nje bacteria n'ime biofilm (10-1 ruo 10-7) na efere na-efe efe (Metck-Millipore). Mgbe awa 24 nke incubation na 37 Celsius C, a rụrụ ọtụtụ plate State na Mueller-Hinton Agar. A rụrụ ọgwụgwọ na oge ọ bụla n'ime ihe ndị dị na mpempe akwụkwọ dị iche iche, na-emeghachi uru dị ukwuu maka nsogbu ọ bụla.
A na - enweta akpụkpọ anụ ezi na nnukwu anụ nwanyị na - acha ọcha n'ime nkeji iri na ise nke egbu egbu dabere na ụkpụrụ mbupụ mbupụ mbufe European Union. Akpụkpọ anụ ahụ na-awụfu ma kpochaa mmanya na-egbu egbu, wee kpọnwụọ oyi na -80 Celsius C ruo awa iri abụọ na anọ iji na-edetu anụ ahụ. Mgbe emechara, cmm akpụkpọ anụ ahụ na-asacha ugboro atọ na pbs, 0,6% sodium hypochlorite, na 70% ethanol maka nkeji 20 oge ọ bụla. Tupu iwepu epidermis, wepụ ethanol ọ bụla fọdụrụ site na ịsa ugboro 3 na sterili na pbs. Akpụkpọ ahụ na-ahụkarị na-elopụ nke ọma na mkpụrụ osisi 0.45-μM-μM-μm-un-milipore) nwere paịlị na-amị amị (Medipo) gbanyere mkpọrọgwụ (Sigma) Ugo. Ọkara (Dulbecco gbanwetụrụ Ugwu Eagle - ALDRICH LTD.).
A na-eto Biofilms biofilms dị ka akọwara maka ihe nkiri biofilm. Mgbe ha kọchara Biofilm na akpụkpọ ahụ ruo awa 72, a na-etinye Bioflm na osisi na-eji ihe mkpuchi na-enweghị atụ na akpụkpọ ahụ na akpụkpọ ahụ. Mgbe ahụ, a na-etinye Biofilm na dermis ezì maka otu awa 24 na 37 Celsius C iji kwe ka biofilm tozuo ma na-agbaso anụ ezi. Mgbe bioflilm nwere tozuru oke ma tinye ya, akwa nke 1.5 cm 3, etinyere ya na mmiri na-enweghị atụ, tinyere ya na elu ahụ ma tinye ya na 37 Celsius C ruo awa 24. Ndị nje bacteria na-ahụkarị site na ijikọ ọnụ site na iji akwụkwọ Restoblie na-eme nyocha site na ebe a na-eme ihe nkiri (Pomaley, Bayley, UK) na-akụ ya maka 5 nkeji. Jiri igwefoto diica dfc425 mee ihe iji weghara ihe osise Leica Mz8 microscope. A na-ejikọ ya na pink na-acha odo odo na-eji ụdị nke ihe onyonyo 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (Mediacy.com)). Emere microscopy eletrik ka akọwara n'okpuru.
A na-eme ka nje dị n'otu abalị 1: 100 na Mueller-Hinson Broth. A na-agbakwunye 200 μl ọdịbendị na smoothe 0ory 0.2 μm cyman cyclore membrane (ihe Maidstone, UK) na UK-Hinton Agar. A na-etinye efere Biofilm na 37 Celsius C maka awa 72 iji kwe ka usoro nduru dị mma.
Mgbe ụbọchị 3 nke Biofilm, a na-etinye bandeeji 3 cm 3 cm 3 Mgbe iwepu bandeeji biofilm, 1 ml nke celloblue sel viabogen (Infritrogen, Waltham, Ma) ka etinyere na elu biofilm ọ bụla maka sekọnd iri abụọ. A na-akpọnwụ na-acha uhie uhie tupu agbanwee agba gbanwere site na iji igwefoto dikon D2300 (Nikon UK LTD., Kingston, UK).
Jikere ugbonnication n'abali na Muerher-Hinton Agar, onye na - ebufe otu ihe ruru 10 ml muler-hinson efere na ihe na - awụba na 37 Celsius C (100 rpm). Mgbe a kwa abalị . . A na-etinye ya tozuru okè biofilm na ọnya ahụ dịka akọwara n'okpuru.
Ọrụ niile nwere anụmanụ na Mahadum Manchester n'okpuru ikike ọrụ nke ọdịmma anụmanụ na nyocha nke ụlọ ọrụ na-edepụtara site na Home Offines n'okpuru ASPA tọgbọsịrị ASPA. Ndị ode akwụkwọ niile na-agbaso ntuziaka ịbịabata. A na-eji ọmụmụ C57by / 6. A na-ejikarị ụmụ oke na ISOFLURAANE (Pirimali Pritical Leal Leven Ltd, West Drayton, UK) na-awụpụkwa ya na mbara igwe ma hichaa ya. A na-enyezi òké ọ bụla 2 × 6 ọgwụ ọnya 2 m site na iji Roofol Punch (Schuco International, Hertfordshire, UK). Maka ọnya Biofilm, tinye 72 na-eme ihe dị ka elekere 72 na-akọwa n'elu akpụkpọ ahụ dị ka akọwara na Dermal oyi akwa nke na-enweghị atụ na-enweghị nsogbu ozugbo mmerụ ahụ ma tụfuo akpụkpọ ahụ ma tụfuo akpụkpọ ahụ. Otu square centimita nke akwa akwa ka mmiri na-eme ka mmiri na-enweghị atụ iji mee ka ọnya miri emi. A na-etinye akwa ahụ ozugbo na ọnya ọ bụla ma kpuchie ya na 3m Tegaderm ihe nkiri 3m, UK, Fermale, Fermale, Mi) etinyere na nsọtụ ya. Burprenorphine (anụmanụ, York, UK) na ntinye nke 0.1 mg / n'arọ dika analgesic. Igwe ụmụ oke ụbọchị atọ mgbe mmerụ ahụ na-eji usoro 1 wee wepu, wepu, manu, ma chekwaa mpaghara ọnya ahụ dị ka achọrọ.
Hematoxylin (ThermoFisher Scientific) and eosin (ThermoFisher Scientific) staining was performed according to the manufacturer's protocol. Egosiputa mpaghara ọnya na Reepithelization site na iji onyonyo pro ozi onyonyo 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, Md).
A na-etinye ngalaba anụ ahụ na Xylene (Thermoforoup, LEUSRACRADED na 100-50% a na-emegharị Ethanol, na obere afọ sekọndrị). Ejiri Vectohihistiine na-eji vicectain Elite ABC PK-6104 Kit (Vector Tabtoratories, Burlighto, Counttol nke onye nrụpụta si kwuo. A na-eji ọgwụ mgbochi nke Neetrophil na-eme ihe ọ bụla (R14 (Macrophophages MS CD107B (BD BIOSCION na-agbakwunye na mbara ihu, na-esochi na-egbochi ya ABC na Vector Nova Red Peroxidase (HRP) A nwetara ihe osise na iji microscope BX43 na igwefoto dijitalụ DP73 (Olympus, Southnend-on Oké Osimiri, UK).
Edozila ihe nlele akpụkpọ ahụ na 2.5% glutaldehyde na 4% na hepes (ph 7.4) maka awa 24 na 4 Celsius C. A na-eji ihe nlele na-eji ihe atụ na-eji ethanol na-eme akara na CO2 na-eji usoro a na-eji ọla edo na-eji ọla edo. A na-etinye ụdị nke a na-eji eme ihe na-enyocha micron.cpe micron (themmofornificiaficiafic) iji hụ ihe dị mkpa nke ọnya ahụ.
A na-etinye (2 iodide (2 μm) Ejiri nkeji iri na ise mee ihe ngosi Z-stack site na iji Leica TCs SP8.
Ederede ndu na teknụzụ data ebulite ma nyocha site na iji eserese Prismad V9 sọftụwia (ngwanrọPa, CA). A na-eji nyocha otu ụzọ dị iche iche site na iji nyocha nke Dunnett na-eji nwale DOC lect nwalele maka ọdịiche dị n'etiti ọgwụgwọ ọ bụla na akwa na-enweghị ọgwụ mgbochi. A na-ahụta uru PLỌ <0.05 dị mkpa.
Ebu ụzọ lelee ụdị ejiji gel ọla ọcha nke ọla ọcha na Biofilm nke staphylococcus aureus na pseudomonas aeruuginosa na vitro. Uwe ọlaọcha nwere usoro ọla ọcha: akwa ọdịnala ọla ọcha na-ewepụta AG1 +; Uwe ọlaọcha, nke nwere ike iwepụta Ag1 + mgbe mgbakwunye Edta / BC, nwere ike ibibi nje Bita ma na-ekpughere nje Biofilm na nje na-enweghị ihe ọ bụla. Eons15 na akwa nwere nnu ogin ogin na-emepụta Ag1 +, Ag2 + na Aons. E jiri ya tụnyere ụdị ejiji na-abụghị nke na-abụghị nke na-abụghị nke na-abụghị nke na-abụghị nke na-abụghị nke na-abụghị nke na-enweghị mgbochi. Njegharị nje na-efe efe n'ime biofilm ọ bụla awa 24 maka ụbọchị 8 (ọgụgụ 1). N'ụbọchị 5, a na-ejigharị Biofilm na 3.85 × 10s 105s. Staphylococcus auro ma ọ bụ 1.22 × 105p. Augunosa iji chọpụta mgbake Bifilm. E jiri ya tụnyere uwe njikwa na-abụghị nke na-abụghị nke na-abụghị nke na-abụghị nke na-abụghị nke na-enweghị ike na nje nje na staphyloccus auruus na pseudomonas augunosa ihe karịrị ụbọchị ise. N'ụzọ dị iche, uwe nwere ọdịda oxygen na Ag1 + Edta / BCA dị irè na igbu nje n'ime biofilm n'ime ụbọchị ise. Mgbe emechara inoculation na nje bacteria PlankNonic n'ụbọchị 5, enweghị mweghachi nke biofilm (Fig 1).
Olu nke nje bacteria na staphylococcus aures na pseudomonas augunosa biofilms mgbe ọgwụgwọ ọlaọcha. A na-emeso ndị Biofilm nke Stafylococcus aureus na pseudomonas aerugunosa na akwa akwa na-enweghị mgbochi, yana ọnụ ọgụgụ nje na-enweghị ike na-ezube kwa awa 24. Mgbe ụbọchị ise gachara, a na-ejigharị Biflalm na 3.85 × 10s. Staphylococcus auro ma ọ bụ 1.22 × 105p. Oginies nke nje bacterioplankton pseudomas aeruginosa na-eme ka ha nyochaa mgbake Biofilm. Ihe osise eserese pụtara +/- ọkọlọtọ.
Iji thụọ mmetụta nke akwa ọla ọcha na Bifilm Viality, a na-etinye akwa iji tozuru oke biofilms toro na porcine anụ ahụ na-eme. Mgbe awa 24 gasịrị, a na-ewepụ akwa ahụ na biofilm na-eme mkpọtụ na-emegharị anya na-emegharị anya na-acha anụnụ anụnụ, nke nje bacteria bibiri pink. Biofild mesoro akwa ejiji bụ pink, na-egosi ọnụnọ nke nje bacteria n'ime biofilm (ọgụgụ 2a). N'ụzọ dị iche, biofilm na-emeso ndị Exysols na-eji akwa ehi na-acha anụnụ anụnụ, na-egosi na nje ndị ọzọ dị n'elu anụ ezi ahụ bụ nje 2b). A na-ahụta agba na-acha anụnụ anụnụ na pink na Biofils na-emeso ya na Bortolm (Ọgụ nke Edta / BC na-acha anụnụ anụnụ nwere ụfọdụ ntụpọ pink. na-egosi ebe a na-enweghị akara ọla ọcha (ọgụgụ 2d). Onu ogugu nke oru (pink) na adighi adi (nke anụnụ anụnụ) gosipụtara na njikwa njikwa bụ 75% na-arụ ọrụ (ọgụgụ 2E). Ag1 + + Edta / BC eji eji eji akwa oxygen oxygen, nke nwere oke ịdị ndụ nke 13% na 14%, n'otu n'otu. Ag1 + ejiji na-akpatakwa nje viaciality site na 21%. A na-ahụkwa biofilms ndị a site na iji microscopy electron (Sọm). Mgbe usoro eji eme ihe na njikwa Ag1 +, a na-ahụ pseudonas aeruuginosa anụ ahụ (ọnụọgụ nje na-acha na mkpụrụ ndụ nje na-ahụ maka nje na-eme ihe ole na ole. Enwere ike ịtụle eriri anụ ahụ dị ka ihe anụ ahụ corcine (ọgụgụ 2g). Mgbe Ag1 ji ọgwụgwọ na Ag1 + Edta / BC, ihe na-eme ihe na-eme ihe, nje na-ahụ anya na-ahụ maka ihe ndị na-egbu egbu (Ọgụ 2I).
Nlele nke pseudomonas augunosa biofilm mgbe ọgwụgwọ ọla ọcha. (A-D) Vaudomonas aeruuginosa biofilms toro eto na-eji ihe osise na-eme ihe na-adịghị mma awa iri abụọ na anọ ma ọ bụ akwa na-enweghị mgbochi. Bactoria dị ndụ na-acha pink, nje na-adịghị efe efe na anụ ezi na-acha anụnụ anụnụ. (E) Nrọ nke pseudomonas aeruuginosa biofilms toro eto eto (ntụpọ pink) site na iji akwa eji eme ihe ma ọ bụ akwa na-enweghị ọgwụ mgbochi maka awa iri abụọ na anọ. Small bar = 5 μm. (J-m) Livelsms na-eto eto na nzacha na frimable na premableulu na-emegharị anya whew mgbe 24 nke incubation nwere akwa ọlaọcha.
Iji kpebie ma imechi n'etiti uwe na biofilms metụtara ịdị irè nke akwa ahụ, a na-emeso ihe eji eme ihe ruo awa iri abụọ na anọ. Ọkụ na-enweghị atụ bụ pink pink na agba (ọgụgụ 2J). N'ụzọ dị iche na Biflolds na-emeso akwa nnu (ọgụgụ 2k), biofils mesoro Ag1 + ma ọ bụ Edta / BC na-egosi njigide nke na-acha odo odo (ọgụgụ 2l, m). Agba pink a na-egosi ọnụnọ nke nje bacteria ma na-ejikọ ya na mpaghara ịzarịtara n'ime akwa. Ebe ndị a sewn na-emepụta oghere ndị nwụrụ anwụ na-ekwe ka nje ndị na-ekwe ka nje bactilm n'ime biofilm ịlanarị.
Iji nyochaa arụmọrụ ọlaọcha na vivo, ọnya na-egbu egbu nke oke butere na-ebute akwa na P. Auguugunona biofilms ma ọ bụ uwe ọla ọcha. Mgbe ụbọchị 3 gasịrị, nyocha onyonyo Macroscopic gosipụtara obere ọnya mgbe ọ na-eji akwa oyungen oxygen tụnyere akwa njikwa na akwa akwa ọla ọcha (eserese 3a-h). Iji gosi na ihe ndị a mere, a na-egbute ihe ndị a, ọnya na-egbute ya na ime ọnya na nmeghachi azụ na hematoxylin na ngalaba nke na-eji ụdị ọla kọle na eositoxy na-eji ụdị onyonyo nke 10 (Figure 3I-L).
Mmetụta nke akwa ọla ọcha na ọnya ahụ dị elu ma re-epithelization nke ọnya na-ebute Biofilms. (A-H) Obere mkpụrụ ndụ na-arịa Bseudomas nke pseudomosas augunosa (e-d) mgbe ụbọchị atọ gasịrị, akwa eyịgay, na Ag1 + Uwe. Ihe onyonyo nke Macroscopic. Ọkụ nke ụmụ oke nke oke na Ag1 + + Edta / BC. (Il) Onye nnọchi anya Pseudomas na-efe efe, ngalaba akụkọ ihe mere eme na hematoxylin na eosini, nke a na-eji ógbè ọnya na epithelial. Olu nke mpaghara ọnya (m) na pasent Reepithelilization (n, p) nke ọnya na-ebute pseofilms (kwa ihe egwuregwu n = 12). Ihe osise eserese pụtara +/- ọkọlọtọ. * pụtara p = <0.05 * pụtara p = <0.01; Macroscopic Smale = 2.5 mm, ogo akụkọ ihe mere eme = 500 μm.
Otutu uzo ọnya na-ebute pseudomonas aurudomosa biofilm (ọgụgụ nke na-enweghị ọnya nke 3.1 mm2, nke na-abụghị eziokwu. rute ihe dị mkpa (ọgụgụ 3m). p = 0.423). Ọkụ merụrụ na Ag1 + ma ọ bụ Ag1 ma ọ bụ Edta / BC na-enweghị mbelata na mpaghara ọnya (3.1 mm2 na 3.6 mm2, n'otu n'otu). Ọgwụ na Eyere Eyere Eyere Ag Ag Ag Epithelization na-akwalite elu karịa nke na-abụghị nke na-abụghị nke na-abụghị nke na-abụghị nke na-abụghị nke Ag1 + ma ọ bụ 10% na 11%) ( Ọgụgụ 3N). . , KPỌRỌ.
A chọpụtara na usoro yiri nke ọnya na mpaghara ọnya na nke epithelial na ọnya nje na-ebute S. Augus Biofilms (Figure 3o). Uwe nwere akwa oyuyo oil oxygen beaneracted (2.0 mm2) site na 23 mm2 ma e jiri ya tụnyere nchịkwa na-enweghị mgbochi (p = 0.304) (Fig 3o). Na mgbakwunye, mpaghara ọnya dị na Ag1 + na-ebelata (2.4 mm2), ebe ọnya ahụ mesoro Ag1 + mmm2). Oxygen nnu na-akwalitekwa re-epithelization nke ọnya na-ebute na S.%, P = 0.003). Ag1 + uwe (16%, p = 0.903) 1 EDTA / BC: 5%, P = 0.965) gosipụtara ọkwa nke epithelilation yiri njikwa epithelilation yiri njikwa nke Epithelical.
Iji hụ mmetụta nke ọlaọcha na Matrik Matrix, Toto 1 na Syto 60 motoidide rụrụ (Fig 4). Toto 1 iodide bụ mkpụrụ ndụ na-adịghị ike nke enwere ike iji mee ka ọ na-ahụ nke ọma na-eji anya ya na-ahụ nke ọma, nke na-aba ụba na EPs nke Biofilms. Syto 60 bụ sel na-eme ike yie dị ka onye isi. Ihe ngosi nke Toto 1 na Syto 60'oodide na ọnya nke Pseudomosas Aous (Figure 4a) gosipụtara na mgbe ụbọchị atọ gasịrị, EPS na biofilm na-ebelata. Iri oilde oxyged ogin na Ag1 + + Edta / Bc. Ag1 + uwe na-enweghị ihe ndị ọzọ na-enweghị ike belata DNA-Frees-Free DNA na Pseudomonas aeruuginosa na-arụ ọrụ na ọnya.
Na vivo chee echiche nke ọnya biofilm mgbe ụbọchị 3 nke ọgwụgwọ ma ọ bụ uwe ọla ọcha. Ihe onyonyo nzuzo nke pseudomonas aeruuginosa (A-D) na staphyloccus na totocialil nucleic acid, ihe mejuputara nke polymels. Iji beactallual nucleillar acid, jiri Syto 60 (Red). acid. P. Nyochaa microscopy eletrik nke ọnya na-ebute pseudomonas auruginosa (m-p) biofilms mgbe ụbọchị 3 nke ọgwụgwọ na uwe ọla ọcha. Small bar = 5 μm. Consocal Online ihe nlere anya = 50 μm.
Nyochaa microscopy elektrọn gosipụtara na oke bioflonas nke pseudomonas aureuus (ọgụgụ 4M-h)
Iji nyochaa mmetụta nke ọla ọcha na Barofilm-oria, ngalaba nke nje biofilm na-ejikọ ya na-eji ọgwụ mgbochi ruo ụbọchị atọ. Mkpebi siri ike nke neutrophils na macrophphophages n'ime. anụ ahụ granulation. Ọgụgụ 5). Uwe ọla ọcha niile belata ọnụ ọgụgụ nke neutrophls na macrophages n'ime ọnya na-ebute pseudomonas aeruuginosa na-enweghị ọgwụ mgbochi mgbe atọ ọgwụgwọ. Agbanyeghị, ọgwụgwọ na akwa oil oxygen si akwa akwa oil oxyged rụpụtara na neutrophils (p = <0.0001) Tụnyere uwe elu ọla ọcha ndị ọzọ (ọgụgụ 5I, J). Ọ bụ ezie na Ag1 + Edta / BC nwere mmetụta dị ukwuu na ọnya birlolm, ọ belatara neutroph na ọkwa ma ọ bụ macrophage ruo obere karịa Ag1 + uwe. A na-ahụkwa ọnya ọnya na-ebute na S. Aurees Bifilm mgbe agịrị ejiji na Ag (P = 0.0043) Oxistols tụnyere njide. A na-ahụ usoro yiri nke ahụ maka neutropenia. bandeeji (fig 5k). Agbanyeghị, ọ bụ naanị aga oxygen nnu gosipụtara nnukwu mbelata na ọnụ ọgụgụ nke anụ ahụ na-efegharị na-ebute ya na S. Augus Biofilms (p = 0.0339).
A na-amanye neutrophls na macrophages na ọnya nje na-ebute pseudomonas augunosa na staphylocosalial na-enweghị mgbochi ma ọ bụ akwa ọlaọcha. Neetrophs (AD) na macrophphages (eh) na ngalaba akwara anụ ahụ mebiri emebi maka neutrophils ma ọ bụ macrophages. Onu ogugu neutrophs (i na k) na macrophages (J na L) na pseudomosas auruuginosa bu (m na staphylococcus aus (k & l) biofilms. N = 12 kwa otu. Ihe ngosi eserese pụtara +/ *** pụtara p = <0.001; na-egosi p = <0.0001).
Anyị na-enyocha mmetụta nke akwa ọla ọcha na ọgwụgwọ na-efe efe. Ọ na-egbochi ọnya na-enweghị nje na-enweghị mgbochi ma ọ bụ akwa ọla ọcha maka ụbọchị 3 (ọgụgụ 6). N'etiti uwe ọla ọcha nwalere, ọ bụ naanị ọnya na-eji akwa oxygen pụtara obere ihe oyiyi macroscopic karịa ọnya na-emeso ya na njikwa (chepụta 6a-d). Onu ogugu nke ihe eji eme ihe mere eme ihe mere eme ka ihe oyuyo oyuyo a choro 2.96 mm2 ma e jiri ya tụnyere 2.96 mm2 . 6i). N'ụzọ dị iche, a na-ahụ mbelata nke ọnya ọnya mgbe ag1 + (3.38 mm2, p = bc (4.054) iji akwa njikwa. A na-achọpụta Intetheliral Agy na-eji akwa ehi ehi na-atụnyere ndị otu na-ejikọ (30% VS. 22), p = 0.067), nke a dị mkpa ma gosipụta nsonaazụ gara aga. Uwe ehi na ehi ehi na-akwalite re-epithelilization. -Nalilization nke ọnya na - enweghị ike :17. N'ụzọ dị iche, ọgwụgwọ na Ag1 + ma ọ bụ Ag1 + ma ọ bụ akwa BC enweghị mmetụta ma ọ bụ gosipụta belatara re-epithelization e ji achịkwa.
Mmetụta nke ọla ọcha na-ejikwa ọnya na-agwọ ọnya na oke na-enweghị nnu na ntuli aka zuru oke. (AD) ihe osise Macroscopic nke ọnya mgbe ụbọchị atọ nke ọgwụgwọ na-enweghị ọgwụ na-enweghị mgbochi na akwa akwa. (Eh) Nọmba ngalaba ọnya na-ata ata na hematoxylin na eosin. A na-agbakọ ọtụtụ mpaghara ọnya (i) na pasent nke Reepithelization (j) nke ihe nchọgharị ahụ na-eji sọftụ ihe onyonyo (n = 11-12 kwa otu ọgwụgwọ). Ihe osise eserese pụtara +/- ọkọlọtọ. * pụtara p = <0.05.
Silver nwere ogologo oge nke iji dị ka ọgwụgwọ antimicrobial na ọnya na-agwọ ọnya, mana ọtụtụ usoro dị iche iche nwere ike ibute ọdịiche na arụmọrụ 18. Ọzọkwa, a na-aghọtaghị ngwa Njirimara nke nnyefe ngwà nnyefe zuru oke. Ọ bụ ezie na mmeghachi omume na-alụsi omume ike bụ ihe dị irè megide nje bacteria Planktomic, ọ bụchaghị ihe dị irè megide Bifilms19. Planktonic bacteria are readily phagocytosed by macrophages, but within biofilms, aggregated cells pose additional problems by limiting the host response to the extent that immune cells can undergo apoptosis and release proinflammatory factors to enhance the immune response20. Achọpụtala na ụfọdụ leukocytes nwere ike ịbanye Biofilms21 mana enweghị ike ịbanye na nje phagocytose ozugbo agbachitere a na-emebi ego22. Ekwesịrị iji usoro dị elu iji kwado nzaghachi mgbochi mgbochi megide megide ọnya biofilm. Ọkpụkpụ ọnya nwere ike ịkpaghasị biofilm ma wepu ọtụtụ Biobolm, mana nzaghachi mgbochi ọrịa nwere ike ịbụ onye na-enweghị ike ime ihe na-adịghị mma na-enweghị nsogbu ọ bụla. Ya mere, ọgwụgwọ antimicrobial dị ka akwa ọla ọcha nwere ike ịkwado nzaghachi na-egbochi ya ma kpochapụ ọrịa bifilm. Ihe mejupụtara, itinye uche, ị ga-ekwenyere ngụgụ, na mkpụrụ nnyefe nwere ike imetụta ịdị ọcha nke ọlaọcha. N'afọ ndị na-adịbeghị anya, ọganihu na teknụzụ nhazi ọlaọcha emeela ka ndị a dị irè9,23. Dị ka ọganihu teknụzụ ọla ọcha, ọ dị mkpa ịghọta ịdị irè nke akwa ndị a na-achịkwa ụdị ọla ọcha na ọgwụgwọ ndị a na-ahụ maka ọnya na ọgwụgwọ.
N'ime ọmụmụ ihe a, anyị ji ụdị ejiji ọlaọcha dị elu nke nwere mgbaji ọlaọcha dị elu na-emepụta Ag1 + na-eji vitro na vitrodị Vivo. Anyị na-enyocha mmetụta nke uwe ndị a na-agwọ ọnya na ọgwụgwọ ọrịa. Iji belata mmetụta nke matrix nnyefe, akara eji akwa ọla ọcha niile nwere ifuru ọla ọcha.
Ntụle nke ụlọ akwụkwọ ọlaọcha a na-eme nke Pseudomonas Augunosa na Stantococcus Aure na-egosi na ag na-acha uhie uhie, AG1 dị irè na 5 ụbọchị ole na ole. Na mgbakwunye, akwa ndị a na-egbochi ịmegharị ihe bifillm mgbe ọ na-ekpughegharị ugboro ugboro na nje bacteria Plankncic. Ag1 + ejiji nwere ọla ọcha chloride, ogige ọla ọcha na isi Matrik dị ka Ag1 + / Edta / BC, ma nwee mmetụta ọ bụla na nje na-aga n'ime otu biofilm n'otu oge. Nlere ahụ Ag1 + + Edta / BCA na-arụ ọrụ dị irè na-akwado echiche nke ọlaọcha na-akwado arụmọrụ nke ọla ọcha ebe ozo15. Ihe ndị a rụpụtara na-akwado echiche ahụ BC na Edta na-arụ ọrụ ọzọ na-enye aka dị irè na nke Ag1 + nwere ike nyere aka gosipụta na ọdịda vitro. Anyị chọpụtara na Ag Ixygen na-emepụta Ag2 + na Ag3 + na-egosi na AG1 + na ọkwa ndị yiri AG1 + Edta / Bc. Agbanyeghị, n'ihi ikike dị elu, ọ bụ ya na-adị ogologo Ag3 + eons na-arụ ọrụ ma dị irè megide ọnya biofilms na ya mere inwetakwu ọmụmụ ihe. Ọzọkwa, enwere ọtụtụ uwe dị iche iche na-ewulite Ag1 + nke a na-anwaleghị n'ọmụmụ ihe a. E nwere uwe ndị a dị iche iche, ihe dị iche iche, nke nwere ike imetụta nnyefe Ag1 + na ịdịmma ha megide Biofilms. Ọ dịkwa mma ka e wepụta na enwere ọtụtụ dị iche na Virro na na Vivo Models na-ejikwa akwa nke akwa ọnya megide Biofilms. Typedị ụdị ihe nlereanya ejirila, yana nnu na protein nke mgbasa ozi eji eji n'ụdị ndị a, ga-emetụta arụmọrụ nke akwa ahụ. N'ime anyị na Vivioddị Vivo, anyị kwere ka biofilm tozuo na vitro ma bufee ya na mbara ala nke ọnya ahụ. Mmeghachi omume na-ahụ maka ndị ọrụ na-arụ ọrụ dị nnọọ iche na nje bacteria Planknciiki metụtara ọnya ahụ, si otú ahụ na-akpụ osisi biofilm dịka ọnya ahụ gwụrụ. Agbakwunye nke Bifilm tozuru oke na ọnya na-egbochi arụmọrụ nke nzaghachi nnabata nke Bifilm site na ikwe ka biofilm guzosie ike tupu ịgwọ ọrịa. N'ihi ya, ihe nlereanya anyị na-enye anyị ohere ịtụle arụmọrụ nke mgbama antimicrobial na Biofilms tupu ọnya amalite ịgwọ.
Anyị chọpụtakwara na ejiji dị mma metụtara arụmọrụ ọlaọcha na vitro na poofilms na anụ porcine. A na-ahụta mmegbu ahụ na ọnya ahụ bụ ihe dị mkpa maka arụmọrụ antimicrobial nke akwa24,25. Uwe a na-eji akwa oil oxyged nwere ezigbo Biofilms tozuru oke, na-ebute mbelata nke nje na-efe efe n'ime awa 24. N'ụzọ dị iche, mgbe a na-emeso ya na Ag1 + na Ag1 + Edta / BC, ọnụ ọgụgụ dị mkpa nke nje bacteria a na-efe efe. Uwe ndị a nwere sọọsọ n'akụkụ ogologo uwe, nke na-eme ka oghere ndị nwụrụ anwụ na-egbochi mmekọrịta chirilm. N'ime ọmụmụ Victor, mpaghara ndị a na-abụghị ndị na-abụghị ihe na-egbochi igbu nje ndị nwere ike ịrịa nje bacteria n'ime biofilm. Anyị enyochala nje nje naanị mgbe awa 24 gasịrị; Ka oge na-aga, uwe ndị ahụ na-abawanye ụba, enwere ike ịnwe oghere nwụrụ anwụ, na-ebelata mpaghara maka nje nje ndị a. Agbanyeghị, nke a na-akọwapụta mkpa nke ihe ejiji, ọ bụghị naanị ụdị ọlaọkụ na mgbakwasa.
Ọ bụ ezie na ọmụmụ vitro bara uru maka ịtụle arụmọrụ nke teknụzụ ọlaọcha dị iche iche, ebe ndị na-ahụ maka anụ ahụ na-adịgide adịgide na-atụnye ụtụ na oke uwe na-emetụta Biofilms. A na-ahụ mmetụta nke akwa ndị a na mmerụ ahụ na-eji microscopy na-enyocha micronm microsm na ndị IPS na-eji ụdị intracellular. Anyị chọpụtara na mgbe ụbọchị 3 nke ọgwụgwọ gasịrị, uwe niile dị irè na ibelata ọnya sel na Biofilm na nje dị irè na staphylococcus oria a. Nyochaa microsropy elektrọn gosipụtara na obere nje na-adịkarị na akwa ọla ọcha nnu na Ag1 + Edta / BC eji ejiji As1 +. Ihe data ndị a na-egosi na akwa ọlaọcha na-anwale nwere ogo dị iche iche na Biofilm, na-akwado mkpa maka usoro iji mesoo ọrịa ndị Biflm; eji ngwa agha ọla ọcha. A na-ebugharị ọgwụ anụ ahụ site na njikọta anụ ahụ iji wepu ọtụtụ biofilm.
Ọrịa na-adịghị ala ala na-enwekarị ọnya na-egbu egbu, na-enwe oke sel na-efe efe na akwara anụ ahụ na ịbelata oxygen dị ka metabolism na-arụ ọrụ nke ọma. Biofilms na-eme ka ihe ọjọọ a na-egbochi ihe ndị a na-egbochi ihe ndị na-adịghị mma na-emetụta ọgwụgwọ dị iche iche, gụnyere nsogbu nke akwara sel na ịgbalị nke cytokines cytokines27. Dị ka akwa ọla ọcha na-adị irè, ọ dị mkpa ịghọta mmetụta ha nwere na gburugburu ọnya na ọgwụgwọ.
Ọ dị mma ịmara na uwe ọla ọcha na-emetụta ihe mejupụtara biofilm, naanị akwa ọla ọcha oxygen na-abawanye na exithellization nke ọnya ndị a butere. Nkwado data ndị a na-akwado nchọta anyị gara aga17 na ndị Kalan et al. (2017) 28, nke gosipụtara ezi nchekwa na profaịlụ ọlaọcha oil oil oil oil oil oil oil oil oil oil oxyged oil oil oil oil oil oil oxyged oxyged.
Ọmụmụ ihe anyị dị ugbu a na-eme ka ọdịiche dị na teknụzụ ọlaọcha dị n'etiti mgbakọ ọlaọcha na mmetụta nke teknụzụ a na ọgwụgwọ nke nnwere onwe. Agbanyeghị, nsonaazụ ndị a dị iche na ọmụmụ gara aga gosipụtara na Ag1 + Edta / BC eji ejiji na-agwọ ọrịa na vivo. Agbanyeghị, nke a nwere ike ịbụ ihe dị iche na ụdị anụmanụ, oge na-atụ, na usoro ngwa nje29. N'okwu a, a na-ewere ọnya ahụ ụbọchị iri na abụọ mgbe mmerụ ahụ ga-eme ka ihe ndị na-arụ ọrụ na-eme ihe iji mee ihe na-eme ihe dị ogologo oge. A na-akwado nke a site na nyocha nke na-arịa ụnya ụkwụ na-arịa Ag1 + Edta / BC na mbụ na-esote izu atọ na Ag1 + Edta / BC na n'ime izu anọ Ojiji nke antimicrobias. ọgwụ. Uwe cmc iji belata ogo nke ulcer30.
E gosipụtara ụdị ụfọdụ na ịnwere ike ịbụ cytotoxic na vitro 11, mana ndị a na nsonaazụ vitro anaghị atụgharịgharị na mmetụta ọjọọ na Vivo. Na mgbakwunye, ọganihu dị na teknụzụ ọla ọcha dị mma na itinye uche na ndọtị na akwa ndị uwe dị mma na uwe dị mma. Agbanyeghị, dị ka ọganihu teknụzụ na-eji akwa akwa, ọ dị mkpa ịghọta mmetụta akwa ndị a na ọnya gburugburu ebe obibi gburugburu ebe obibi gburugburu ebe obibi gburugburu. ".33. A na-akọ na mbụ na mmụba elu nke re-epithelization kwekọrọ na ụba ọnụego nke mgbochi mkpali m2 macrophageges ma e jiri ya tụnyere pro-inflotype. Egosiputara nke a na ihe eji eme ihe na-ewu ewu ebe e ji akwa eji eme ihe oyuyo ọla ọcha mee ihe eji eji ọla ọcha. Hydrogels34.
Ọrịa na-adịghị ala ala nwere ike igosipụta oke mbufụt, a chọpụtala na ọnụnọ nke oke neutrophils nwere ike bụrụ ihe na-emebi ọnya ọnya na-agwọ ọnya. Na nnyocha na-eme na ụmụ oke neutrophil-amị amị, ọnụnọ nke neutrophils na-egbu oge na-egbu oge. Ọnụnọ nke oke neutrophils na-eduga n'ọtụtụ ebe dị elu na ụdị ikuku oxygen, dị ka oke na hydrogen peroxide, nke jikọtara ya na ọnya ọnya na-adịghị ala ala na nke na-agwọ ọrịa ọnya na-adịghị ala ala na nke na-agwọ ọrịa ọnya na-adịghị ala ala ma na-agwọ ọrịa ọnya na-adịghị ala ala na nke na-agwọ ọrịa na-adịghị ala ala na nke na-agwọ ọrịa. N'otu aka ahụ, mmụba nke nọmba Macrophala, ma ọ bụrụ na achịkwaghị achịkwa, nwere ike ibute oge ọnya na-egbu oge ịgwọ ọnya 39. Mmụba a dị oke mkpa ma ọ bụrụ na macrophophages enweghị ike ibute phenotype phenotype na pro-influtype na phenotpe na-agwọ ọrịa pro-influtpe, nke na-ebute ọnya na-eme ka ọ ghara ịpụ na ọnya afọ 400. Anyị na-etinye mbelata na macrophphls na macrophphages na biofilm-nje na-efe efe mgbe ụbọchị 3 nke ọgwụgwọ, ma mbelata ọla edo na oyuyo oxygen. Nke a nwere ike ịbụ nsonaazụ sitere na nzaghachi na-egbochi ya, ma ọ bụ na ọnya ahụ belatara na-emecha ọgwụgwọ na-ebelata ọnya ahụ. Na-ebelata ọnụ ọgụgụ mkpụrụ ndụ ọnya na ọnya ahụ nwere ike idobe gburugburu ebe obibi ịgwọ ọnya ahụ. Usoro ihe omume nke otu Ag Okelyts na-akwalite ọgwụgwọ nke nnwere onwe, mana ike nke hydrogen peroxide, onye ogbugbo nke mbufụt, nwere ike ịkọwa nke a ma chọọ ọmụmụ ihe ndị ọzọ.
Ọgwụ na-adịghị ala ala na-adịghị na-agwọ ọrịa na-akpata nsogbu maka ndị dọkịta na ndị ọrịa. Ọ bụ ezie na ọtụtụ akwa ejiji na-ekwu dị ike nke arụmọrụ, nyocha adịghị elekwasị anya na ihe ndị ọzọ na-emetụta ọnya ahụ. Ọmụmụ ihe a na-egosi na teknụzụ ọlaọcha dị iche iche nwere arụmọrụ antimicro nke dị iche iche, ihe dị mkpa, mmetụta dị iche iche na ọnya gburugburu na ọgwụgwọ, nweere ọrịa. Ọ bụ ezie na ndị a na vitro na-egosi arụmọrụ nke akwa ndị a na ọgwụgwọ chọrọ ọgwụgwọ, na-akwadoghị ọnwụnwa a chọrọ iji nyochaa arụmọrụ ndị a na ụlọ ọgwụ.
Datasets eji na / ma ọ bụ nyocha n'oge ọmụmụ ugbu a dị site na onye edemede kwekọrọ na arịrịọ ezi uche dị na ya.
Oge post: Jul-15-2024