Daalụ maka ịga leta Nature.com. Ụdị ihe nchọgharị ị na-eji nwere nkwado CSS pere mpe. Maka nsonaazụ kacha mma, anyị na-akwado ka ị jiri ụdị ihe nchọgharị gị ọhụrụ (ma ọ bụ gbanyụọ Ụdị Ndakọrịta na Internet Explorer). Ka ọ dị ugbu a, iji hụ na nkwado na-aga n'ihu, anyị na-egosi saịtị ahụ na-enweghị nhazi ma ọ bụ JavaScript.
Mmụba nje dị n'ime ọnya na-apụtakarị dị ka ihe nkiri biofilm, nke na-egbochi ọgwụgwọ ma sie ike iwepụ. Ihe mkpuchi ọlaọcha ọhụrụ na-ekwu na ha na-alụso ọrịa ọnya ọgụ, mana arụmọrụ ha na ọgwụgwọ na-adabereghị na ọrịa abụghị ihe a na-amaghị. Site na iji ụdị ihe nkiri biofilm nke Staphylococcus aureus na Pseudomonas aeruginosa na in vitro na in vivo, anyị na-akọ banyere irè nke ihe mkpuchi Ag1+ na-emepụta ion; ihe mkpuchi Ag1+ nwere ethylenediaminetetraacetic acid na benzetonium chloride (Ag1+/EDTA/BC), na ihe mkpuchi nwere silver nitrate (Ag oxysalts)., nke na-emepụta ions Ag1+, Ag2+ na Ag3+ iji lụso biofilm ọnya ọgụ na mmetụta ya na ọgwụgwọ. Ihe mkpuchi Ag1+ nwere obere mmetụta na biofilm ọnya na in vitro na na òké (C57BL/6j). N'ụzọ dị iche, nnu Ag nwere oxygen na ihe mkpuchi Ag1+/EDTA/BC belatara ọnụọgụ nje bacteria dị ndụ na biofilms in vitro ma gosipụta mbelata dị ukwuu na ihe ndị metụtara nje bacteria na EPS na biofilms ọnya òké. Ihe mkpuchi ndị a nwere mmetụta dị iche iche na ọgwụgwọ nke ọnya ndị nwere biofilm na ndị na-abụghị biofilm, yana ihe mkpuchi nnu oxygen nwere mmetụta bara uru karịa na reepithelialization, nha ọnya, na mbufụt ma e jiri ya tụnyere ọgwụgwọ njikwa na ihe mkpuchi ọlaọcha ndị ọzọ. Njirimara physicochemical dị iche iche nke ihe mkpuchi ọlaọcha nwere ike inwe mmetụta dị iche iche na biofilm ọnya na ọgwụgwọ, a kwesịkwara ịtụle nke a mgbe ị na-ahọrọ ihe mkpuchi maka ọgwụgwọ nke ọnya ndị nwere biofilm.
A na-akọwa ọnyá ndị na-adịghị ala ala dị ka "ọnyá ndị na-anaghị aga n'ihu site na ọkwa ọgwụgwọ nkịtị n'usoro na n'oge" 1. Ọnya ndị na-adịghị ala ala na-emepụta ibu arọ nke uche, mmekọrịta mmadụ na ibe ya na akụ na ụba maka ndị ọrịa na usoro nlekọta ahụike. A na-emefu ego NHS kwa afọ na ọgwụgwọ ọnyá na ọrịa ndị metụtara ya na £8.3 ijeri na 2017–182. Ọnya ndị na-adịghị ala ala bụkwa nsogbu dị oke mkpa ugbu a na United States, ebe Medicare na-eme atụmatụ na ọnụ ahịa kwa afọ nke ịgwọ ndị ọrịa nwere ọnyá na $28.1–$96.8 ijeri3.
Ọrịa bụ isi ihe na-egbochi ọgwụgwọ ọnya. Ọrịa na-apụtakarị dị ka ihe nkiri biofilm, nke dị na 78% nke ọnya ndị na-adịghị agwọ ọrịa na-adịghị ala ala. Ihe nkiri biofilm na-etolite mgbe ụmụ nje ndị dị ndụ jikọtara ọnụ na elu, dị ka elu ọnya, ma nwee ike ịgbakọta iji mepụta obodo ndị na-emepụta polymer (EPS) na-eme ka ahụ ghara ịgbake. Ihe nkiri biofilm na-ejikọta ya na mmụba nke nzaghachi mkpali nke na-eduga na mmebi anụ ahụ, nke nwere ike igbu oge ma ọ bụ gbochie ọgwụgwọ4. Mmụba nke mmebi anụ ahụ nwere ike ịbụ n'ihi mmụba nke ọrụ nke matrix metalloproteinases, collagenase, elastase na ụdị oxygen reactive5. Ọzọkwa, mkpụrụ ndụ mkpali na biofilm bụ ndị na-eji oxygen eme ihe nke ukwuu ma nwee ike ibute hypoxia anụ ahụ mpaghara, na-ebelata mkpụrụ ndụ nke oxygen dị mkpa dị mkpa maka ndozi anụ ahụ dị irè6.
Ihe nkiri biofilm ndị tozuru okè na-eguzogide ọgwụ nje, ha chọrọ usoro siri ike iji chịkwaa ọrịa biofilm, dịka ọgwụgwọ igwe, ya na ọgwụgwọ nje dị irè. Ebe ọ bụ na ihe nkiri biofilm nwere ike ịmaliteghachi ngwa ngwa, ọgwụ nje dị irè nwere ike ibelata ihe egwu nke ịmaliteghachi mgbe a wachara ya ahụ.
A na-ejikarị ọlaọcha eme ihe n'ihe ndị na-egbu nje, a na-ejikwa ya eme ihe dị ka ọgwụgwọ mbụ maka ọnyá ndị na-arịa ọrịa na-adịghị ala ala. E nwere ọtụtụ ihe ndị e ji ọlaọcha mee n'ahịa, nke ọ bụla nwere ihe mejupụtara ọlaọcha dị iche iche, ntinye uche, na matrix ntọala. Ọganihu na ihe ndị e ji ọlaọcha mee emeela ka e nwee ihe ndị e ji ọlaọcha mee ọhụrụ. Ụdị ọlaọcha (Ag0) anaghị arụ ọrụ; Iji nweta irè ọgwụ nje, ọ ga-efunahụ elektrọn iji mepụta ọlaọcha ionic (Ag1+). Ihe ndị e ji ọlaọcha mee n'oge ochie nwere ihe ndị e ji ọlaọcha mee ma ọ bụ ọlaọcha ọla nke, mgbe a na-ekpughe ya na mmiri mmiri, na-agbaze iji mepụta ion Ag1+. Aion Ag1+ ndị a na-emeghachi omume na mkpụrụ ndụ nje, na-ewepụ elektrọn site na ihe owuwu ma ọ bụ usoro dị mkpa maka ndụ. Teknụzụ e ji ikike nweta emeela ka e nwee ihe ọhụrụ e ji ọlaọcha mee, Ag oxysalts (silver nitrate, Ag7NO11), nke dị na ihe ndị e ji egbu ọnya. N'adịghị ka ọlaọcha ọdịnala, mmebi nke nnu nwere oxygen na-emepụta ọnọdụ ọlaọcha nwere valence dị elu (Ag1+, Ag2+ na Ag3+). Nnyocha in vitro egosila na obere nnu ọlaọcha nwere oxygen dị irè karịa otu ion ọlaọcha (Ag1+) megide nje bacteria na-akpata ọrịa dịka Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus na Escherichia coli8,9. Ụdị ọhụrụ ọzọ nke ihe mkpuchi ọlaọcha gụnyere ihe ndị ọzọ, ya bụ ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) na benzetonium chloride (BC), nke a kọrọ na ha na-elekwasị anya na biofilm EPS ma si otú a mee ka ọlaọcha banye na biofilm dịkwuo mma. Teknụzụ ọlaọcha ọhụrụ ndị a na-enye ụzọ ọhụrụ iji lekwasị anya na biofilm ọnya. Agbanyeghị, mmetụta nke ọgwụ nje ndị a na gburugburu ọnya na ọgwụgwọ na-adabereghị na ọrịa dị mkpa iji hụ na ha anaghị emepụta gburugburu ọnya na-adịghị mma ma ọ bụ gbuo oge ọgwụgwọ. Akọpụtala nchegbu gbasara cytotoxicity ọlaọcha in vitro na ọtụtụ ihe mkpuchi ọlaọcha10,11. Agbanyeghị, cytotoxicity in vitro akọwapụtabeghị na toxicity in vivo, ọtụtụ ihe mkpuchi Ag1+ egosipụtakwala ezigbo profaịlụ nchekwa12.
N'ebe a, anyị nyochara irè nke ihe mkpuchi carboxymethylcellulose nke nwere usoro ọlaọcha ọhụrụ megide biofilm ọnya n'ime vitro na n'ime ahụ. Na mgbakwunye, a tụlere mmetụta nke ihe mkpuchi ndị a na nzaghachi ahụ ji alụso ọrịa ọgụ na ọgwụgwọ n'adabereghị na ọrịa.
E nwere ihe mkpuchi niile e ji mee ihe n'ahịa. 3M Kerracel Gel Fiber Dressing (3M, Knutsford, UK) bụ ihe mkpuchi eriri gel nke na-abụghị nke nje bacteria 100% carboxymethylcellulose (CMC) nke e ji mee ihe mkpuchi njikwa n'ọmụmụ ihe a. E lere ihe mkpuchi ọlaọcha CMC atọ dị irè, ya bụ ihe mkpuchi ọlaọcha 3M Kerracel Ag (3M, Knutsford, UK), nke nwere 1.7 wt% nnu ọlaọcha oxygenated (Ag7NO11) na ion ọlaọcha valence dị elu (Ag1+, Ag2+ na Ag3+). N'oge mmebi nke Ag7NO11, a na-emepụta ion Ag1+, Ag2+ na Ag3+ na oke nke 1:2:4. Ngwakọta Aquacel Ag nke nwere 1.2% ọlaọcha chloride (Ag1+) (ConvaTec, Deeside, UK) 13 na Aquacel Ag + Ngwakọta mgbakwunye nke nwere 1.2% ọlaọcha chloride (Ag1+), EDTA na benzetonium chloride (ConvaTec, Deeside, UK) 14.
Ụdị nje ndị e ji mee nnyocha a bụ Pseudomonas aeruginosa NCTC 10781 (Public Health England, Salisbury) na Staphylococcus aureus NCTC 6571 (Public Health England, Salisbury).
A kụrụ nje bacteria n'ime ofe Muller-Hinton (Oxoid, Altrincham, UK) n'abalị. E wee gwakọta ofe Mueller-Hinton 1:100 ma tinye 200 µl n'elu akpụkpọ ahụ Whatman cyclopore 0.2 µm (Whatman plc, Maidstone, UK) n'elu efere agar Mueller-Hinton (Sigma-Aldrich Company Ltd, Kent, Great Britain). ) E guzobere biofilm colonial na 37°C ruo awa 24. E nwalere biofilm ndị a colonial maka mbelata logarithmic.
Bee ihe e ji mee ya n'ime iberibe square 3 cm2 ma jiri mmiri e tinyere n'ime ya mee ka ọ dị mmiri mmiri tupu oge eruo. Tinye ihe mkpuchi ahụ n'elu ihe mkpuchi biofilm nke colony ahụ n'elu efere agar. E wepụrụ ihe mkpuchi biofilm ọ bụla dị hekta 24, a na-agbakọkwa nje bacteria dị ndụ n'ime ihe mkpuchi biofilm (CFU/ml) site na ịgbaze ya n'usoro (10−1 ruo 10−7) na broth nke na-adịghị emerụ ahụ n'akụkụ ụbọchị (Merck-Millipore). Mgbe awa 24 nke ịgbaze ya na okpomọkụ 37°C gasịrị, e mere ọnụọgụ efere ọkọlọtọ na efere agar Mueller-Hinton. E mere ọgwụgwọ na oge ọ bụla n'ụzọ atọ, e mekwara ọnụọgụ efere ugboro abụọ maka ịgbaze ọ bụla.
A na-enweta akpụkpọ anụ ezi n'ime nkeji iri na ise nke e gbuchara ya dịka ụkpụrụ mbupụ nke European Union si dị. A kpụchara akpụkpọ ahụ ma hichaa ya na ihe nhicha mmanya, wee kpọnwụọ ya na -80°C ruo awa iri abụọ na anọ iji mee ka akpụkpọ ahụ gbazee. Mgbe agbazechara, a sachara akpụkpọ ahụ 1 cm2 ugboro atọ na PBS, 0.6% sodium hypochlorite, na 70% ethanol maka nkeji iri abụọ oge ọ bụla. Tupu ewepụ epidermis ahụ, wepụ ethanol ọ bụla fọdụrụ site na ịsa ya ugboro atọ na PBS dị ọcha. A kụrụ akpụkpọ ahụ n'ime efere olulu 6 nwere akpụkpọ ahụ naịlọn dị 0.45 μm n'elu ya na ihe mgbochi mmiri atọ (Merck-Millipore) nke nwere serum ehi fetal 3 ml (Sigma) nke ejiri 10% Dulbecco's modified Eagle mee. Medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium – Aldrich Ltd.).
A na-akụ ihe nkiri biofilm ndị colonial dịka akọwara maka ọmụmụ ihe gbasara biofilm. Mgbe e gbuchara ihe nkiri biofilm dị na akpụkpọ ahụ ruo awa iri asaa na abụọ, e jiri ihe mkpuchi inoculation dị ọcha tinye biofilm ahụ n'elu akpụkpọ ahụ site na iji ihe mkpuchi inoculation dị ọcha wee wepụ akpụkpọ ahụ. E wee tinye biofilm ahụ n'elu akpụkpọ anụ ezi ahụ ruo awa iri abụọ na anọ ọzọ na 37°C iji mee ka biofilm ahụ tozuo oke ma rapara n'akpụkpọ anụ ezi ahụ. Mgbe biofilm ahụ tozuworo eto ma tinye ya, e tinyere ihe mkpuchi 1.5 cm2, nke e ji mmiri a gwakọtara agwakọta mee, ozugbo n'elu akpụkpọ ahụ ma tinye ya na 37°C ruo awa iri abụọ na anọ. E jiri otu ihe ahụ hụ nje bacteria ndị na-adị ndụ site n'itinye ihe mkpuchi PrestoBlue cell viability reagent (Invitrogen, Life Technologies, Paisley, UK) n'elu apical nke ọ bụla ma tinye ya na apical elu nke ọ bụla ma tinye ya na apical elu maka nkeji ise. Jiri igwefoto dijitalụ Leica DFC425 sere foto ozugbo na igwe onyonyo Leica MZ8. E jiri ngwanrọ Image Pro nke 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (mediacy.com)) chọpụta mpaghara ndị nwere agba pink. E mere nyocha elektrọn microscopy dịka akọwara n'okpuru.
A gwakọtara nje bacteria a kụrụ n'otu abalị 1:100 na ofe Mueller-Hinton. A gbakwụnye 200 μl nke ọdịbendị na akpụkpọ ahụ Whatman cyclopore nke dị 0.2 μm (Whatman, Maidstone, UK) ma tinye ya na agar Mueller-Hinton. E tinyere efere biofilm na okpomọkụ 37°C ruo awa 72 iji mee ka biofilm tozuo oke.
Mgbe ụbọchị atọ nke biofilm tochara, e tinyere bandeeji 3 cm2 square na biofilm ahụ ozugbo ma tinye ya na okpomọkụ 37°C ruo awa 24. Mgbe ewepụchara bandeeji ahụ n'elu biofilm ahụ, etinyere 1 ml nke PrestoBlue Cell Viability Reagent (Invitrogen, Waltham, MA) n'elu biofilm ọ bụla ruo sekọnd 20. E kpọrọ nkụ elu ya tupu e dekọọ mgbanwe agba site na iji igwefoto dijitalụ Nikon D2300 (Nikon UK Ltd., Kingston, UK).
Kwadebe ihe ọkụkụ ndị a n'abalị na agar Mueller-Hinton, bufee ihe ọkụkụ nke ọ bụla n'ime ofe Mueller-Hinton 10 ml wee tinye ya na shaker na 37°C (100 rpm). Mgbe a gbanyechara ihe ọkụkụ ahụ n'abalị, a gwakọtara ihe ọkụkụ ahụ na ofe Mueller-Hinton 1:100 ma hụ 300 µl n'elu akpụkpọ ahụ Whatman cyclopore gburugburu 0.2 µm (Whatman International, Maidstone, UK) na agar Mueller-Hinton ma tinye ya na 37°C n'ime awa 72. E tinyere ihe nkiri biofilm ahụ toro eto na ọnya ahụ dịka akọwara n'okpuru.
E mere ọrụ niile metụtara anụmanụ na Mahadum Manchester n'okpuru ikike ọrụ nke Ụlọ Ọrụ Na-ahụ Maka Ahụ́ Ike na Ụkpụrụ Omume kwadoro (P8721BD27) ma dịka ntuziaka nke Ụlọ Ọrụ Obodo bipụtara n'okpuru ASPA emelitere nke 2012. Ndị edemede niile gbasoro ntuziaka mbata. E jiri òké C57BL/6j dị izu asatọ (Envigo, Oxon, UK) mee ihe maka ọmụmụ ihe niile dị na vivo. E jiri isoflurane (Piramal Critical Care Ltd, West Drayton, UK) mee ka òké ahụ ṅụọ ọgwụ ọjọọ, a kpụọkwa elu azụ ha ma hichaa ha. E wee nye òké ọ bụla ọnya mwepụ nke 2 × 6 mm site na iji Stiefel biopsy punch (Schuco International, Hertfordshire, UK). Maka ọnyá ndị nwere biofilm, tinye biofilm colonial awa 72 nke a kụrụ na membrane dịka akọwara n'elu na oyi akwa akpụkpọ ahụ nke ọnya ahụ site na iji oghere inoculation dị ọcha ozugbo merụsịrị ahụ ma tụfuo akpụkpọ ahụ. A na-etinye otu square centimita nke ihe mkpuchi tupu oge eruo na mmiri dị ọcha iji mee ka ọnya dị mmiri mmiri. E tinyere ihe mkpuchi ozugbo n'ọnyá ọ bụla ma jiri ihe nkiri 3M Tegaderm (3M, Bracknell, UK) na ihe nrapado mmiri Mastisol (Eloquest Healthcare, Ferndale, MI) kpuchie ya gburugburu nsọtụ iji nye nrapado ọzọ. E nyere Buprenorphine (Animalcare, York, UK) na mkpokọta 0.1 mg/kg dị ka ihe na-egbu mgbu. Bee òké ụbọchị atọ mgbe mmerụ ahụ gasịrị site na iji usoro Schedule 1 ma wepụ ya, bee ya abụọ, ma chekwaa ebe ọnya ahụ dịka ọ dị mkpa.
E mere ntụpọ Hematoxylin (ThermoFisher Scientific) na eosin (ThermoFisher Scientific) dịka usoro onye nrụpụta si dị. E jiri ngwanrọ Image Pro version 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD) tụọ mpaghara ọnya na reepithelialization.
E jiri xylene (ThermoFisher Scientific, Loughborough, UK wepụ akụkụ anụ ahụ, jiri ethanol nke a kpụrụ akpụ 100–50% mee ka ọ dịghachi mmiri, ma mikpuo ya obere oge n'ime mmiri e tinyere ionized (ThermoFisher Scientific). E ji VectaStain Elite ABC PK-6104 kit (Vector Laboratories, Burlingame, CA) mee Immunohistochemistry dịka usoro onye nrụpụta si dị. E jiri ọgwụ mgbochi mbụ nye neutrophils NIMP-R14 (Thermofisher Scientific) na macrophages Ms CD107b Pure M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, UK) gwakọta ya na mmiri mgbochi 1:100 ma tinye ya na elu e bepụrụ, wee jiri ngwa mgbochi abụọ Anti-, VectaStain ABC na Vector Nova Red Peroxidase (HRP) substrate kit (Vector Laboratories, Burlingame, CA) ma jiri hematoxylin mee ya. E ji igwe onyonyo Olympus BX43 na igwefoto dijitalụ Olympus DP73 (Olympus, Southend-on-Sea, UK) nweta onyonyo ndị a.
E tinyere ihe nlele akpụkpọ ahụ na 2.5% glutaraldehyde na 4% formaldehyde na 0.1 M HEPES (pH 7.4) ruo awa 24 na okpomọkụ 4°C. E jiri ethanol a gbazere agbaze ihe nlele ahụ ma kpọọ nkụ na CO2 site na iji ihe nkụ Quorum K850 critical point dryer (Quorum Technologies Ltd, Loughton, UK) ma jiri usoro Quorum SC7620 mini sputterer/glow discharge tee sputter ahụ. E jiri FEI Quanta 250 scanning electron microscope (ThermoFisher Scientific) see ihe nlele ndị ahụ iji hụ isi ebe ọnya ahụ dị.
E tinyere Toto-1 iodide (2 μM) n'elu ọnya òké a chụpụrụ ma tinye ya n'ime akpa maka nkeji ise na okpomọkụ 37 °C (ThermoFisher Scientific) ma jiri Syto-60 (10 μM) gwọọ ya na okpomọkụ 37 °C (ThermoFisher Scientific). E jiri Leica TCS SP8 mepụta onyonyo Z-stack nke nkeji iri na ise.
E jiri ngwanrọ Graphpad Prism V9 (GraphPad Software, La Jolla, CA) depụta ma nyochaa data ndị e ji mee ihe n'ihe gbasara ndụ na teknụzụ. E jiri otu ụzọ nyochaa ọdịiche dị iche iche site na iji ule Dunnett mgbe e mesịrị nwalee ọdịiche dị n'etiti ọgwụgwọ ọ bụla na ihe mgbochi nje bacteria. A na-ewere uru p <0.05 dị ka ihe dị mkpa.
A tụlere irè nke ihe mkpuchi silver gel fibrous na mbụ megide mpaghara biofilm nke Staphylococcus aureus na Pseudomonas aeruginosa in vitro. Ihe mkpuchi silver nwere usoro dị iche iche nke ọlaọcha: ihe mkpuchi silver ọdịnala na-emepụta ion Ag1+; ihe mkpuchi silver, nke nwere ike imepụta ion Ag1+ mgbe etinyere EDTA/BC, nwere ike ibibi matrix biofilm ma kpughee nje bacteria na ọlaọcha n'okpuru mmetụta nje bacteria nke silver. ion15 na ihe mkpuchi nwere nnu Ag oxygenated nke na-emepụta ion Ag1+, Ag2+ na Ag3+. A tụnyere irè ya na ihe mkpuchi njikwa na-abụghị nke nje bacteria nke e ji eriri gelled mee. A tụlere nje bacteria ndị fọdụrụ n'ime ihe mkpuchi silver kwa awa 24 maka ụbọchị 8 (Foto 1). N'ụbọchị nke 5, a na-emegharị ihe nkiri silver na 3.85 × 105S. Staphylococcus aureus ma ọ bụ 1.22×105P. aeruginosa iji nyochaa mgbake biofilm. Ma e jiri ya tụnyere ihe ndị na-anaghị egbochi nje bacteria, ihe ndị na-egbochi nje bacteria na-eme ka nje bacteria dị ndụ na Staphylococcus aureus na Pseudomonas aeruginosa biofilms ruo ụbọchị ise. N'ụzọ dị iche, ihe ndị nwere nnu Ag1+ + EDTA/BC nke nwere oxygen dị irè n'igbu nje bacteria n'ime ihe ndị na-akpata nje bacteria n'ime ụbọchị ise. Mgbe a gbasịrị nje bacteria planktonic ọgwụ ugboro ugboro n'ụbọchị nke ise, a hụghị mweghachi nke ihe ndị na-akpata nje bacteria (Foto 1).
Ngụkọta nje bacteria dị ndụ na Staphylococcus aureus na Pseudomonas aeruginosa biofilms mgbe ejiri ihe mkpuchi ọlaọcha gwọọ ya. E jiri ihe mkpuchi ọlaọcha ma ọ bụ ihe mkpuchi na-abụghị nke nje bacteria gwọọ mpaghara biofilm nke Staphylococcus aureus na Pseudomonas aeruginosa, a chọpụtakwara ọnụọgụ nje bacteria ndị fọdụrụ kwa awa 24. Mgbe ụbọchị ise gachara, e jiri 3.85 × 105S gbanwee biofilm ahụ. Staphylococcus aureus ma ọ bụ 1.22 × 105P. E mepụtara mpaghara nke bacterioplankton Pseudomonas aeruginosa n'otu n'otu iji chọpụta mgbake biofilm. Graphs na-egosi mmejọ ọkọlọtọ nke +/-.
Iji hụ mmetụta nke ihe mkpuchi ọlaọcha na ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndụ ndu ... Emere ihe mkpuchi Ag1+ + EDTA/BC n'otu aka ahụ dịka ihe mkpuchi nnu Ag nwere oxygen, nke nwere ọnụego ndụ nke 13% na 14%, n'otu n'otu. Ihe mkpuchi Ag1+ belatakwara ndụ nje bacteria site na 21%. E mechara hụ ihe nkiri biofilm ndị a site na iji ihe nyocha elektrọn microscopy (SEM). Mgbe ejiri ihe mkpuchi njikwa na ihe mkpuchi Ag1+ gwọọ ya, a hụrụ otu oyi akwa nke Pseudomonas aeruginosa nke na-ekpuchi akpụkpọ anụ ezi (Foto 2F,H), ebe mgbe ejiri ihe mkpuchi Ag1+ gwọọ ya, a hụrụ obere mkpụrụ ndụ nje bacteria na obere mkpụrụ ndụ nje bacteria dị n'okpuru ya. Enwere ike iwere eriri collagen dị ka nhazi anụ ahụ nke akpụkpọ anụ ezi (Foto 2G). Mgbe ejiri ihe mkpuchi Ag1+ + EDTA/BC gwọọ ya, a hụrụ ihe mkpuchi nje bacteria na ihe mkpuchi eriri collagen dị n'okpuru ya (Foto 2I).
Nlereanya nke Pseudomonas aeruginosa biofilm mgbe ọgwụgwọ ọlaọcha gasịrị. (A–D) E jiri agba PrestoBlue viability tee ihe ndị na-eme ka nje bacteria dị ndụ n'ime akpụkpọ anụ ezi awa 24 ka ejiri ihe na-eme ka ọlaọcha ma ọ bụ ihe na-eme ka nje bacteria ghara ịdị irè. Nje bacteria dị ndụ bụ pink, nje bacteria na-adịghị adị ndụ, akpụkpọ anụ ezi na-acha anụnụ anụnụ. (E) Ngụkọta nke ihe ndị na-eme ka nje Pseudomonas aeruginosa dị ndụ nke a kụrụ n'akpụkpọ anụ ezi (ebe pink) site na iji ihe na-enyocha elektrọn microscopy Image Pro version 10 (FI) ma jiri ihe na-eme ka ọlaọcha ma ọ bụ ihe na-eme ka nje bacteria ghara ịdị irè gwọọ ya ruo awa 24. Ogwe nha SEM = 5 µm. (J–M) Ihe ndị na-eme ka nje bacteria dị ndụ toro na nzacha ma jiri ihe na-eme ka mmiri PrestoBlue dị nro mgbe awa 24 nke ịmịnye ya na ihe na-eme ka ọlaọcha ghara ịdị irè tee ya.
Iji chọpụta ma njikọ dị n'etiti ihe mkpuchi na ihe mkpuchi biofilm metụtara irè nke ihe mkpuchi ahụ, e jiri ihe mkpuchi biofilm ndị e tinyere n'elu ala dị larịị gwọọ biofilm ndị e tinyere n'elu ala dị larịị ruo awa 24 wee tee ha agba na-emegharị ahụ. Ihe mkpuchi biofilm a na-agwọghị bụ agba pink gbara ọchịchịrị (Foto 2J). N'adịghị ka ihe mkpuchi biofilm e ji ihe mkpuchi nwere nnu Ag oxygen (Foto 2K), ihe mkpuchi biofilm e ji ihe mkpuchi nwere Ag1+ ma ọ bụ Ag1+ + EDTA/BC tee ya gosiri eriri nke agba pink (Foto 2L,M). Agba pink a na-egosi ọnụnọ nke nje bacteria dị ndụ ma jikọtara ya na mpaghara akwa dị n'ime ihe mkpuchi ahụ. Ebe ndị a a dụkọtara na-emepụta oghere ndị nwụrụ anwụ nke na-ekwe ka nje bacteria dị n'ime ihe mkpuchi biofilm dị ndụ.
Iji chọpụta irè nke ihe mkpuchi ọlaọcha na vivo, e jiri ihe mkpuchi na-anaghị egbochi nje ma ọ bụ ihe mkpuchi ọlaọcha gwọọ ọnyá ndị gbara ọkpụrụkpụ nke òké ndị butere ọrịa S. aureus na P. aeruginosa biofilms ndị toro eto. Mgbe ụbọchị atọ nke ọgwụgwọ gasịrị, nyocha onyonyo macroscopic gosiri obere nha ọnya mgbe ejiri ihe mkpuchi nnu oxygen gwọọ ya ma e jiri ya tụnyere ihe mkpuchi na-abụghị nke nje na ihe mkpuchi ọlaọcha ndị ọzọ (Foto 3A-H). Iji kwado ihe ndị a hụrụ, a gbutere ọnyá ma tụọ mpaghara ọnya ahụ ma tụọ reepithelialization na akụkụ anụ ahụ hematoxylin na eosin nwere ntụpọ site na iji ngwa onyonyo pro ụdị 10 (Foto 3I-L).
Mmetụta nke ihe mkpuchi ọlaọcha n'elu ọnya ahụ na ime ka ọnyá ndị e ji biofilm mee ka ha dịghachi ndụ. (A–H) Obere mkpụrụ ndụ ndị e ji biofilm nke Pseudomonas aeruginosa (A–D) na Staphylococcus aureus (E–H) butere mgbe ụbọchị atọ nke ọgwụgwọ na ihe mkpuchi na-abụghị nke nje bacteria, ihe mkpuchi nnu Ag oxygen, ihe mkpuchi Ag1+, na ihe mkpuchi Ag1+. Foto macroscopic na-anọchite anya ya. ọnya nke òké nwere ihe mkpuchi Ag1+ + EDTA/BC. (IL) Ọrịa Pseudomonas aeruginosa nke nnọchi anya ya, ngalaba histological nke e ji hematoxylin na eosin tee, nke e ji tụọ mpaghara ọnya na mmeghari epithelial. Ọnụọgụ nke mpaghara ọnya (M, O) na pasentị reepithelialization (N, P) nke ọnyá ndị e ji Pseudomonas aeruginosa (M, N) na Staphylococcus aureus (O, P) biofilm mee ka ha dị ndụ (kwa otu ọgwụgwọ n = 12). Eserese na-egosi njehie ọkọlọtọ nke +/- pụtara ìhè. * pụtara p = < 0.05 ** pụtara p = < 0.01; Ọnụọgụ makroscopic = 2.5 mm, ọnụọgụ histological = 500 µm.
Ngụkọta ebe ọnya dị n'ime ọnyá ndị e ji ihe nkiri Pseudomonas aeruginosa mee (Foto 3M) gosiri na ọnyá ndị e ji Ag oxysalts gwọọ nwere nkezi nha ọnya nke 2.5 mm2, ebe ihe mkpuchi ndị na-anaghị egbochi nje nwere nkezi nha ọnya nke 3.1 mm2, nke na-abụghị eziokwu. ruru mkpa ọnụọgụgụ (Foto 3M). p = 0.423). Ọnya ndị e ji Ag1+ ma ọ bụ Ag1+ + EDTA/BC gwọọ egosighi mbelata na mpaghara ọnya (3.1 mm2 na 3.6 mm2, n'otu n'otu). Ọgwụgwọ na ihe mkpuchi nnu Ag oxygenated kwalitere re-epithelialization ruo n'ókè karịa ihe mkpuchi ndị na-abụghị antimicrobial (34% na 15%, n'otu n'otu; p = 0.029) na Ag1+ ma ọ bụ Ag1+ + EDTA/BC (10% na 11%) (Foto 3N). . , n'otu n'otu).
A hụrụ ụdị ihe ndị yiri ya na mpaghara ọnyá na mmụba epithelial n'ime ọnyá ndị nwere ihe nkiri S. aureus biofilm (Foto 3O). Ihe mkpuchi nwere nnu ọlaọcha nwere oxygen belatara mpaghara ọnyá (2.0 mm2) site na 23% ma e jiri ya tụnyere ihe mkpuchi na-abụghị nke nje bacteria (2.6 mm2), ọ bụ ezie na mbelata a adịghị mkpa (p = 0.304) (Foto 3O). Na mgbakwunye, mpaghara ọnyá dị na otu ọgwụgwọ Ag1+ belatara ntakịrị (2.4 mm2), ebe ọnya ahụ ejiri ihe mkpuchi Ag1+ + EDTA/BC gwọọ ebelataghị mpaghara ọnyá ahụ (2.9 mm2). Nnu oxygen nke Ag kwalitekwara mweghachi nke ọnyá ndị nwere ihe nkiri S. aureus biofilm (31%) ruo n'ókè ka ukwuu karịa nke ejiri ihe mkpuchi na-abụghị nke nje bacteria gwọọ (12%, p = 0.003) (Foto 3P). Mgbakwasa Ag1+ (16%, p = 0.903) na mgbakwasa Ag+1 + EDTA/BC (14%, p = 0.965) gosiri ọkwa nke mmeghari epithelial yiri njikwa.
Iji hụ mmetụta nke ihe e ji ọlaọcha mee na matrix biofilm, e mere Toto 1 na Syto 60 iodide agba (Foto 4). Toto 1 iodide bụ agba mkpụrụ ndụ na-anaghị abanye nke enwere ike iji hụ nke ọma na asịd nucleic extracellular, nke jupụtara na EPS nke biofilms. Syto 60 bụ agba mkpụrụ ndụ na-abanye agafe nke ejiri mee ihe dị ka ihe mgbochi16. Nleba anya nke Toto 1 na Syto 60 iodide na ọnya ndị e ji biofilms nke Pseudomonas aeruginosa gbaa (Foto 4A-D) na Staphylococcus aureus (Foto 4I-L) gosiri na mgbe ụbọchị atọ nke ọgwụgwọ, EPS dị na biofilm ahụ belatara nke ukwuu. nwere nnu oxygen Ag na Ag1+ + EDTA/BC. Ihe e ji mee Ag1+ na-enweghị ihe ndị ọzọ na-egbochi nje na-ebelata DNA na-enweghị mkpụrụ ndụ na ọnyá ndị e tinyere Pseudomonas aeruginosa agba mana ha adịghị irè na ọnyá ndị e tinyere Staphylococcus aureus agba.
Foto onyonyo nke ihe onyonyo ọnya mgbe ụbọchị atọ nke ọgwụgwọ gasịrị site na iji ihe mkpuchi njikwa ma ọ bụ ọlaọcha. Foto Confocal nke Pseudomonas aeruginosa (A–D) na Staphylococcus aureus (I–L) nke e ji Toto 1 (akwụkwọ ndụ akwụkwọ ndụ) tee iji hụ anya na asịd nucleic extracellular, nke bụ akụkụ nke polymers biofilm extracellular. Iji tee asịd nucleic intracellular, jiri Syto 60 (uhie). asịd. P. Nyochaa microscopy electron nke ọnya ndị nwere Pseudomonas aeruginosa (E–H) na Staphylococcus aureus (M–P) biofilms mgbe ụbọchị atọ nke ọgwụgwọ na ihe mkpuchi ọlaọcha. SEM scale bar = 5 µm. Confocal imaging scale bar = 50 µm.
Nnyocha eletrọn microscopy gosiri na òké ndị e tinyere ọgwụ biofilm nke Pseudomonas aeruginosa n'ime ha (Foto 4E-H) na Staphylococcus aureus (Foto 4M-P) nwere obere nje bacteria n'ime ọnya ha mgbe ha jiri ihe mkpuchi ọlaọcha niile gwọọ ha ruo ụbọchị atọ.
Iji nyochaa mmetụta nke ihe mkpuchi ọlaọcha nwere na mbufụt ọnya n'ime òké ndị nwere biofilm, e jiri ihe mkpuchi njikwa ma ọ bụ ọlaọcha gwọọ akụkụ nke ọnyá ndị nwere biofilm ruo ụbọchị 3 tee ihe mgbochi immunohistochemical site na iji ọgwụ mgbochi kpọmkwem maka neutrophils na macrophages. Mkpebi ọnụọgụ nke neutrophils na macrophages n'ime. anụ ahụ granulation. Foto 5). Ihe mkpuchi ọlaọcha niile belatara ọnụọgụ neutrophils na macrophages na ọnyá ndị nwere Pseudomonas aeruginosa ma e jiri ya tụnyere ihe mkpuchi na-abụghị antimicrobial mgbe ụbọchị atọ nke ọgwụgwọ gasịrị. Agbanyeghị, ọgwụgwọ na ihe mkpuchi nnu ọlaọcha nwere oxygen mere ka mbelata dị ukwuu na neutrophils (p = <0.0001) na macrophages (p = <0.0001) ma e jiri ya tụnyere ihe mkpuchi ọlaọcha ndị ọzọ a nwalere (Foto 5I,J). Ọ bụ ezie na Ag1+ + EDTA/BC nwere mmetụta ka ukwuu na ihe mkpuchi ọnya, o belatara ọkwa neutrophil na macrophage ruo obere oke karịa ihe mkpuchi Ag1+. A hụkwara ọnyá dị obere nke S. aureus biofilm butere mgbe ejiri Ag (p = <0.0001), Ag1+ (p = 0.0008) na Ag1++ EDTA/BC (p = 0.0043) oxisols tụnyere njikwa. A na-ahụ ụdị mgbanwe ndị yiri ya maka neutropenia. bandeeji (Foto 5K). Agbanyeghị, naanị ihe mkpuchi nnu Ag nke nwere oxygen gosiri mbelata dị ukwuu na ọnụọgụ macrophages na anụ ahụ granulation ma e jiri ya tụnyere njikwa na ọnya ndị nwere S. aureus biofilms butere (p = 0.0339) (Foto 5L).
A tụrụ ọnụọgụgụ Neutrophils na macrophages n'ime ọnyá ndị nwere Pseudomonas aeruginosa na Staphylococcus aureus biofilms mgbe ụbọchị atọ nke ọgwụgwọ na ihe mkpuchi ọlaọcha na-abụghị nke nje bacteria ma ọ bụ nke e ji ọlaọcha mee. A tụrụ ọnụọgụgụ Neutrophils (AD) na macrophages (EH) n'ime akụkụ anụ ahụ nke e ji ọgwụ mgbochi nje mee nke kpọmkwem maka neutrophils ma ọ bụ macrophages. Ọnụọgụ nke neutrophils (I na K) na macrophages (J na L) n'ime ọnyá ndị nwere Pseudomonas aeruginosa (I na J) na Staphylococcus aureus (K & L) biofilms. N = 12 kwa otu. Grafụ na-egosi mmejọ ọkọlọtọ nkezi +/-, ụkpụrụ dị mkpa ma e jiri ya tụnyere ihe mkpuchi njikwa nje bacteria, * pụtara p = < 0.05, ** pụtara p = < 0.01; *** pụtara p = < 0.001; na-egosi p = <0.0001).
Anyị wee nyochaa mmetụta nke ihe mkpuchi ọlaọcha na ọgwụgwọ nke na-adabereghị na ọrịa. E jiri ihe mkpuchi na-abụghị nke nje ma ọ bụ ihe mkpuchi ọlaọcha gwọọ ọnyá ndị na-enweghị ọrịa ahụ ruo ụbọchị atọ (Foto nke 6). N'ime ihe mkpuchi ọlaọcha a nwalere, naanị ọnyá ndị e ji ihe mkpuchi nnu oxygen gwọọ dị obere na onyonyo macroscopic karịa ọnyá ndị e ji njikwa gwọọ (Foto nke 6A-D). Ngụkọta mpaghara ọnyá site na iji nyocha histological gosiri na nkezi mpaghara ọnyá mgbe e jiri ihe mkpuchi Ag oxysols gwọọ bụ 2.35 mm2 ma e jiri ya tụnyere 2.96 mm2 maka ọnyá ndị e ji otu njikwa gwọọ, mana ọdịiche a eruteghị mkpa ọnụọgụgụ (p = 0.488) (Foto nke 6I). N'ụzọ dị iche, ahụghị mbelata na mpaghara ọnya mgbe e jiri ihe mkpuchi Ag1+ (3.38 mm2, p = 0.757) ma ọ bụ Ag1+ + EDTA/BC (4.18 mm2, p = 0.054) gwọọ ya ma e jiri ya tụnyere otu njikwa. A hụrụ mmụba nke mmụgharị epithelial site na iji ihe mkpuchi Ag oxysol ma e jiri ya tụnyere otu njikwa (30% vs. 22%, n'otu n'otu), ọ bụ ezie na nke a erughi ihe dị mkpa (p = 0.067), nke a dị oke mkpa ma na-akwado nsonaazụ gara aga. Mkpuchi na oxysols na-akwalite mmụgharị epithelial. -Mmụgharị nke ọnya ndị na-enweghị nje17. N'ụzọ dị iche, ọgwụgwọ na ihe mkpuchi Ag1+ ma ọ bụ Ag1+ + EDTA/BC enweghị mmetụta ọ bụla ma ọ bụ gosi mbelata mmụgharị epithelial ma e jiri ya tụnyere njikwa.
Mmetụta nke mkpuchi ọnya ọlaọcha na ọgwụgwọ ọnya n'ime òké ndị na-enweghị ọrịa ma wepụchaa ya kpamkpam. (AD) Foto macroscopic nke ọnya ndị a na-ahụ anya mgbe ụbọchị atọ nke ọgwụgwọ gasịrị site na iji ihe mkpuchi na-abụghị nke nje na ihe mkpuchi ọlaọcha. (EH) Akụkụ ọnya ndị a na-ahụ anya nke e ji hematoxylin na eosin tee. A gbakọọ ọnụọgụ nke mpaghara ọnyá (I) na pasent nke reepithelialization (J) site na ngalaba histological dị n'etiti ọnya ahụ site na iji ngwanrọ nyocha onyonyo (n = 11–12 kwa otu ọgwụgwọ). Eserese na-egosi mmejọ ọkọlọtọ nke pụtara +/-. * pụtara p = <0.05.
Ọ dịla anya e ji Silver mee ihe dị ka ọgwụgwọ nje na-agwọ ọnya, mana ọtụtụ usoro na ụzọ nnyefe dị iche iche nwere ike ibute ọdịiche dị na irè nje 18. Ọzọkwa, a ghọtaghị ihe ndị na-egbochi nje nke usoro nnyefe ọlaọcha kpọmkwem. Ọ bụ ezie na nzaghachi mgbochi nje nke onye ọbịa na-arụ ọrụ dị irè megide nje bacteria planktonic, ọ naghị arụ ọrụ nke ọma megide biofilms19. A na-eji macrophages akpata nje bacteria Planktonic ngwa ngwa, mana n'ime biofilms, mkpụrụ ndụ achịkọtara na-ebute nsogbu ndị ọzọ site na igbochi nzaghachi onye ọbịa ruo n'ókè nke na mkpụrụ ndụ ahụ ji alụso ọrịa ọgụ nwere ike ịnweta apoptosis ma wepụta ihe ndị na-akpata mbufụt iji melite nzaghachi ahụ ji alụso ọrịa ọgụ20. A hụla na ụfọdụ leukocytes nwere ike ịbanye na biofilms21 mana ha enweghị ike phagocytose nje ozugbo a gbajiri nchekwa a22. Ekwesịrị iji usoro zuru oke iji kwado nzaghachi ahụ ji alụso ọrịa ọgụ megide ọrịa biofilm ọnya. Mbelata ọnya nwere ike imebi biofilm ahụ ma wepụ ọtụtụ ibu bio, mana nzaghachi ahụ ji alụso ọrịa ọgụ nke onye ọbịa nwere ike ọ gaghị arụ ọrụ megide biofilm fọdụrụ, ọkachasị ma ọ bụrụ na mmeghachi omume ahụ ji alụso ọrịa ọgụ nke onye ọbịa na-emebi. Ya mere, ọgwụgwọ nje dịka ihe mkpuchi ọlaọcha nwere ike ịkwado nzaghachi mgbochi ọrịa nke onye ọbịa ma wepụ ọrịa biofilm. Nhazi, ntinye uche, ịgbaze, na ihe ndị e ji ebufe ihe nwere ike imetụta irè ọgwụ nje nke ọlaọcha. N'afọ ndị na-adịbeghị anya, ọganihu na teknụzụ nhazi ọlaọcha emeela ka ihe mkpuchi ndị a dịkwuo irè9,23. Ka teknụzụ ihe mkpuchi ọlaọcha na-aga n'ihu, ọ dị mkpa ịghọta irè nke ihe mkpuchi ndị a n'ịchịkwa ọrịa ọnya na, nke ka mkpa, mmetụta nke ụdị ọlaọcha ndị a dị ike na gburugburu ọnya na ọgwụgwọ.
N'ọmụmụ ihe a, anyị tụnyere irè nke ihe mkpuchi ọlaọcha abụọ dị elu na ihe mkpuchi ọlaọcha nkịtị nke na-emepụta ion Ag1+ megide biofilms site na iji ụdị in vitro na in vivo dị iche iche. Anyị tụlekwara mmetụta nke ihe mkpuchi ndị a na gburugburu ọnya na ọgwụgwọ na-adabereghị na ọrịa. Iji belata mmetụta nke matrix nnyefe, ihe mkpuchi ọlaọcha niile a nwalere bụ nke carboxymethylcellulose.
Nnyocha mbụ anyị mere gbasara ihe mkpuchi ọlaọcha ndị a megide ihe mkpuchi ndụ nke ndị colonial nke Pseudomonas aeruginosa na Staphylococcus aureus na-egosi na, n'adịghị ka ihe mkpuchi Ag1+ ọdịnala, ihe mkpuchi ọlaọcha abụọ dị elu, Ag1+ + EDTA/BC na nnu Ag oxygenated, dị irè na 5. Na-egbu nje bacteria biofilm nke ọma n'ime ụbọchị ole na ole. Na mgbakwunye, ihe mkpuchi ndị a na-egbochi nhazigharị nke biofilm mgbe e kpugheere ya ugboro ugboro na nje bacteria planktonic. Ihe mkpuchi Ag1+ nwere ọlaọcha chloride, otu ihe mejupụtara ọlaọcha na matrix ntọala dị ka Ag1+ + EDTA/BC, ma nwee mmetụta dị oke na ndụ nje bacteria n'ime ihe mkpuchi ndụ n'otu oge ahụ. Nchọpụta ahụ na ihe mkpuchi Ag1+ + EDTA/BC dị irè karịa megide biofilm karịa ihe mkpuchi Ag1+ nke nwere otu matrix na ihe mejupụtara ọlaọcha na-akwado echiche ahụ na achọrọ ihe ndị ọzọ iji mee ka ịdị irè nke ọlaọcha chloride megide biofilm dịkwuo mma, dịka akọpụtara n'ebe ọzọ15. Nsonaazụ ndị a na-akwado echiche ahụ bụ na BC na EDTA na-arụ ọrụ ọzọ na-enyere aka na ịdị irè nke uwe mwụda n'ozuzu ya nakwa na enweghị ihe a na uwe mwụda Ag1+ nwere ike ịbụ ihe kpatara enweghị ike igosi ịdị irè na vitro. Anyị chọpụtara na uwe mwụda nnu Ag nwere oxygen nke na-emepụta ions Ag2+ na Ag3+ gosipụtara ịdị irè nke nje bacteria karịa Ag1+ na ọkwa yiri Ag1+ + EDTA/BC. Agbanyeghị, n'ihi nnukwu ike redox, ọ bụghị ihe doro anya ogologo oge ions Ag3+ ka na-arụ ọrụ ma dị irè megide biofilms ọnya, ya mere ọ bara uru ịmụkwu ihe. Na mgbakwunye, enwere ọtụtụ uwe mwụda dị iche iche na-emepụta ions Ag1+ nke a na-anwaleghị na ọmụmụ ihe a. Uwe mwụda ndị a nwere ọtụtụ ihe mejupụtara ọlaọcha, njupụta, na matrices isi dị iche iche, nke nwere ike imetụta nnyefe nke ions Ag1+ na irè ha megide biofilms. Ọ dịkwa mkpa ịmara na enwere ọtụtụ ụdị in vitro na in vivo dị iche iche ejiri iji nyochaa irè nke uwe mwụda ọnya megide biofilms. Ụdị ụdị ejiri, yana ọdịnaya nnu na protein nke mgbasa ozi ejiri na ụdị ndị a, ga-emetụta ịdị irè nke uwe mwụda ahụ. N'ime ihe nlereanya in vivo anyị, anyị kwere ka ihe nkiri biofilm ahụ tolite na vitro wee bufee ya n'elu akpụkpọ ahụ nke ọnya ahụ. Mmeghachi omume mgbochi òké na-arụ ọrụ nke ọma megide nje bacteria planktonic etinyere na ọnya ahụ, si otú a na-emepụta ihe nkiri biofilm ka ọnya ahụ na-agwọ. Mgbakwunye nke ihe nkiri biofilm tozuru okè na ọnya na-ebelata irè nke nzaghachi mgbochi nke onye ọbịa na mmepụta ihe nkiri biofilm site n'ikwe ka ihe nkiri biofilm tozuru okè guzosie ike n'ime ọnya ahụ tupu ọgwụgwọ amalite. Ya mere, ihe nlereanya anyị na-enye anyị ohere inyocha irè nke ihe mkpuchi nje na biofilm ndị toro eto tupu ọnyá amalite ịgwọ.
Anyị chọpụtakwara na uwe mwụda ahụ metụtara irè nke uwe mwụda ọlaọcha na biofilm ndị a kụrụ n'ime vitro na akpụkpọ anụ ezi. A na-ewere njikọ chiri anya na ọnya ahụ dị oke mkpa maka irè ọgwụ nje nke uwe mwụda ahụ24,25. Uwe mwụda nwere nnu Ag nwere oxygen nwere njikọ chiri anya na biofilm ndị tozuru okè, nke butere mbelata dị ukwuu na ọnụọgụ nje bacteria dị ndụ n'ime biofilm ahụ mgbe awa 24 gachara. N'ụzọ dị iche, mgbe ejiri uwe mwụda Ag1+ na Ag1+ + EDTA/BC gwọọ ya, ọnụọgụ nje bacteria dị ukwuu fọdụrụ. Uwe mwụda ndị a nwere akwa n'ogologo uwe mwụda ahụ dum, nke na-emepụta oghere nwụrụ anwụ nke na-egbochi mmekọrịta chiri anya na biofilm ahụ. Na ọmụmụ ihe anyị na vitro, ebe ndị a na-anaghị emetụ aka gbochiri igbu nje bacteria dị ndụ n'ime biofilm ahụ. Anyị nyochachara ndụ nje bacteria naanị mgbe awa 24 gachara ọgwụgwọ; Ka oge na-aga, ka uwe mwụda ahụ na-eju afọ karịa, enwere ike inwe obere oghere nwụrụ anwụ, na-ebelata mpaghara maka nje bacteria ndị a dị ndụ. Agbanyeghị, nke a na-egosipụta mkpa nke ihe mejupụtara uwe mwụda ahụ, ọ bụghị naanị ụdị ọlaọcha dị na uwe mwụda ahụ.
Ọ bụ ezie na ọmụmụ in vitro bara uru maka ịtụle irè nke teknụzụ ọlaọcha dị iche iche, ọ dịkwa mkpa ịghọta mmetụta nke ihe ndị a na-eme na biofilms na vivo, ebe anụ ahụ na-anabata na nzaghachi mgbochi ọrịa na-enye aka na irè nke ihe ndị a na-eme megide biofilms. A hụrụ mmetụta nke ihe ndị a na biofilms ọnya site na iji nyocha electron microscopy na EPS staining nke biofilm site na iji agba DNA intracellular na extracellular. Anyị chọpụtara na mgbe ụbọchị 3 nke ọgwụgwọ gasịrị, ihe niile dị irè n'ibelata DNA na-enweghị mkpụrụ ndụ na ọnya ndị nwere biofilm, mana ihe ndị Ag1+ adịghị arụ ọrụ nke ọma na ọnya ndị nwere Staphylococcus aureus. Nyocha electron microscopy gosikwara na obere nje bacteria dị na ọnya ndị e ji ihe ndị a na-eme gwọọ, ọ bụ ezie na nke a pụtara ìhè karịa na ihe ndị a na-eme na nnu Ag oxygenated na ihe ndị a na-eme Ag1+ + EDTA/BC ma e jiri ya tụnyere ihe ndị a na-eme Ag1+. Data ndị a na-egosi na ihe ndị a na-eme na ọlaọcha nwere mmetụta dị iche iche na nhazi biofilm, mana ọ dịghị nke ọ bụla n'ime ihe ndị a na-eme nwere ike iwepụ biofilm ahụ, na-akwado mkpa ọ dị maka ụzọ zuru oke maka ọgwụgwọ nke ọrịa biofilm ọnya; iji eriri aka ọlaọcha. A na-ebu ụzọ kpụọ ihe e ji ewepụ ihe nkiri ahụ tupu ọgwụgwọ ahụ.
Ọnya ndị na-adịghị ala ala na-enwekarị nnukwu mbufụt, ebe mkpụrụ ndụ mbufụt karịrị akarị na-anọgide n'ime anụ ahụ ọnya ahụ ruo ogologo oge, na-akpata mmebi anụ ahụ ma na-ebelata oxygen dị mkpa maka metabolism na ọrụ dị mma na ọnya ahụ26. Ihe nkiri biofilm na-eme ka gburugburu ọnya a dị njọ site n'imetụta ọgwụgwọ n'ụzọ dị iche iche, gụnyere igbochi mmụba nke mkpụrụ ndụ na ịkwaga na ime ka cytokines proinflammatory rụọ ọrụ27. Ka ihe mkpuchi ọlaọcha na-adị irè karị, ọ dị mkpa ịghọta mmetụta ha nwere na gburugburu ọnya na ọgwụgwọ.
Ọ dị mma ịmara na ọ bụ ezie na ihe mkpuchi ọlaọcha niile metụtara ihe mejupụtara ihe nkiri biofilm, naanị ihe mkpuchi nnu ọlaọcha nwere oxygen mere ka mmerụ ahụ ndị a butere ọrịa dịkwuo mma. Data ndị a na-akwado ihe anyị chọpụtara na mbụ17 na nke Kalan et al. (2017)28, nke gosipụtara ezigbo nchekwa na nsí nke nnu ọlaọcha nwere oxygen, ebe obere mkpokọta ọlaọcha dị irè megide ihe nkiri biofilm.
Nnyocha anyị ugbu a na-egosi ọdịiche dị na teknụzụ ọlaọcha dị n'etiti ihe mkpuchi ọlaọcha na-egbu nje na mmetụta nke teknụzụ a nwere na gburugburu ọnya na ọgwụgwọ na-adabereghị na ọrịa. Agbanyeghị, nsonaazụ ndị a dị iche na ọmụmụ ndị gara aga na-egosi na ihe mkpuchi Ag1+ + EDTA/BC meziwanye paramita ọgwụgwọ nke ntị oke bekee merụrụ ahụ na vivo. Agbanyeghị, nke a nwere ike ịbụ n'ihi ọdịiche dị na ụdị anụmanụ, oge nha, na ụzọ eji nje bacteria eme ihe29. N'okwu a, e mere nha ọnya ụbọchị 12 ka ihe ndị dị na ihe mkpuchi ahụ mechara rụọ ọrụ na biofilm ahụ ruo ogologo oge. Nnyocha gosiri na ọnya ụkwụ ndị ọrịa butere na Ag1+ + EDTA/BC mụbara na mbụ mgbe otu izu nke ọgwụgwọ gasịrị, wee n'ime izu atọ sochirinụ nke ọgwụgwọ na Ag1+ + EDTA/BC na n'ime izu anọ nke ojiji nke ọgwụ ndị na-abụghị nje. ọgwụ. Ihe mkpuchi CMC iji belata nha ọnya30.
A na-egosi na ụfọdụ ụdị na mkpokọta ọlaọcha na-egbu egbu na mbụ na vitro 11, mana nsonaazụ in vitro ndị a anaghị eduga mgbe niile na mmetụta ọjọọ na vivo. Na mgbakwunye, ọganihu na teknụzụ ọlaọcha na nghọta ka mma nke ngwakọta ọlaọcha na mkpokọta na ihe mkpuchi emeela ka e nwee ọtụtụ ihe mkpuchi ọlaọcha dị mma ma dị irè. Agbanyeghị, ka teknụzụ ihe mkpuchi ọlaọcha na-aga n'ihu, ọ dị mkpa ịghọta mmetụta nke ihe mkpuchi ndị a na gburugburu ọnya31,32,33. A kọrọ na mbụ na mmụba nke ọnụego re-epithelialization kwekọrọ na mmụba nke oke M2 macrophages mgbochi mkpali ma e jiri ya tụnyere ụdị M1 pro-inflammatory. A hụrụ nke a na ụdị òké gara aga ebe a na-atụnyere ihe mkpuchi ọnya silver hydrogel na silver sulfadiazine na hydrogels na-abụghị antimicrobial34.
Ọnya ndị na-adịghị ala ala nwere ike igosi oke mbufụt, a hụkwara na ọnụnọ nke oke neutrophils nwere ike imebi ọgwụgwọ ọnya35. N'ọmụmụ ihe emere na oke neutrophil ndị na-adịghị mma, ọnụnọ nke neutrophils na-egbu oge ịmaliteghachi epithelialization. Ọnụnọ nke oke neutrophils na-eduga n'ọkwa dị elu nke proteases na ụdị oxygen reactive, dị ka superoxide na hydrogen peroxide, nke jikọtara ya na ọnya ndị na-adịghị ala ala na ndị na-agwọ nwayọ nwayọ37,38. N'otu aka ahụ, mmụba na ọnụọgụ macrophage, ọ bụrụ na achịkwaghị ya, nwere ike ibute ọgwụgwọ ọnya na-egbu oge39. Mmụba a dị mkpa karịsịa ma ọ bụrụ na macrophages enweghị ike ịgbanwe site na ụdị pro-inflammatory gaa na ụdị pro-healing, na-ebute ọnyá ndị na-anaghị apụ n'oge mkpali nke ọgwụgwọ40. Anyị hụrụ mbelata na neutrophils na macrophages na ọnyá ndị nwere nje biofilm mgbe ụbọchị 3 nke ọgwụgwọ na ihe mkpuchi ọlaọcha niile gasịrị, mana mbelata ahụ pụtara ìhè karịa site na ihe mkpuchi nnu oxygenated. Mbelata a nwere ike ịbụ nsonaazụ kpọmkwem nke nzaghachi ahụ ji alụso ọrịa ọgụ na ọlaọcha, nzaghachi maka mbelata ibu bio, ma ọ bụ ọnya ahụ nọ n'ọkwa ọgwụgwọ ọzọ, ya mere a na-ebelata mkpụrụ ndụ ihe nketa na ọnya ahụ. Mbelata ọnụọgụ nke mkpụrụ ndụ ihe nketa na ọnya ahụ nwere ike ịnọgide na-enwe gburugburu ebe obibi dị mma maka ọgwụgwọ ọnya. Usoro nke otu Ag oxysalts si eme ihe na-akwalite ọgwụgwọ na-adabereghị na ọrịa edoghị anya, mana ikike Ag oxysalts nwere ịmepụta oxygen ma bibie ọkwa dị ize ndụ nke hydrogen peroxide, onye na-eme ka mbufụt pụta, nwere ike ịkọwa nke a ma chọọ ọmụmụ ihe ọzọ17.
Ọnya ndị butere ọrịa na-adịghị ala ala nke na-anaghị agwọ ọrịa na-akpata nsogbu nye ma ndị dọkịta ma ndị ọrịa. Ọ bụ ezie na ọtụtụ uwe mwụda na-ekwu na ha na-arụ ọrụ nke ọma megide nje, nnyocha anaghị elekwasị anya n'ihe ndị ọzọ dị mkpa na-emetụta gburugburu ebe obibi ọnya ahụ. Ọmụmụ ihe a na-egosi na teknụzụ ọlaọcha dị iche iche nwere mmetụta dị iche iche na nje na, nke dị mkpa, mmetụta dị iche iche na gburugburu ebe obibi na ọgwụgwọ, n'agbanyeghị ọrịa. Ọ bụ ezie na ọmụmụ ihe ndị a na vitro na in vivo na-egosi irè nke uwe mwụda ndị a n'ịgwọ ọrịa ọnya na ịkwalite ọgwụgwọ, a chọrọ nnwale ndị a na-achịkwaghị achịkwa iji nyochaa irè nke uwe mwụda ndị a na ụlọ ọgwụ.
A na-enweta data ndị ejiri mee ihe na/ma ọ bụ nyochaa n'oge ọmụmụ ihe a site n'aka onye dere ya ma ọ bụrụ na ọ rịọ ya nke ọma.
Oge ozi: Julaị-15-2024